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대장균과 포유류 세포 내에서 parkin의 발현 양상에 관한 연구
남민경, 박혜민, 최주연, 박효진, 정광철, 강성만, 임향숙, Nam. Min-Kyung, Park. Hye-Min, Choi. Ju-Youn, Park. Hyo-Jin, Chung. Kwang Chul, Kang. Seong man, Rhim. Hya 한국생명과학회 생명과학회지 7 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2005, Vol.15 No.6 916-922 (7 pages)
정제할 수 있는 방법을 정립하였다. 저온의 배양조건에서 0.01 mM의 IPTC로 발현을 유도한 결과 $90\%$ 이상의 순도를 가지는 완전한 크기의 Parkin을 정제할 수 있었다. 또한, 여러 tag을 갖는 Parkin plasmid를 제작하였을 뿐만 아니라, 이들을 HEK293 세포에 transfection하여 Parkin의 발현 양상을 비교 분석하였다. 그 결과 Parkin의 N-말단에 pretense에 민감한 절단 부위가 존재한다는 사실을 확인하였다. 본 연구에서 정립한 Parkin 정제법과 포유류 세포에서 Parkin의 발현 양상에 대한 결과는 Parkin의 기질을 탐색하고,그들이... -
C형 간염바이러스 E2 단백질에 결합하는 추정 세포수용체 cDNA의 클로닝
이성락, 백재은, 석대현, 박세광, 최인학 한국생명과학회 생명과학회지 10 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2003, Vol.13 No.4 541-550 (10 pages)
을 발현하는 phage들은 수용성 E2단백질을 이용한 결합중화반응 결과 E2 단백질에 특이적으로 결합함이 확인되었다. 사람 T 세포에서 주로 발현되는 CCR7 유전자를 PHA로 활성화된 사람 T 세포의 total RNA를 이용하여 증폭하고 클로닝하였다. 293T 세포에 transfection시켜 단백질 발현양상을 flow cytometer로 분석하여 70% 이상의 세포들이 CCR7을 발현하고 있음을 관찰하였다. 수용성 E2 단백질을 CCR7이 transfection된 세포와 mock transfection된 대조군 세포에 각각 반응시킨 결과 dose-dependent 양상으로 CCR7에 결합하였다. -
배양세포의 Type에 따른 Constitutive Androstane 수용체 (CAR)의 CYP2B PBRU 전사활성 효과: Hep G2와 COS 세포의 비교
한국생명과학회 생명과학회지 2003, Vol.13 No.3 324-332 (9 pages)
CAR유전자를 transfection시켰을 경우 PBRU의 활성을 촉진시켰다. 지금까지 연구된 CAR의 역할은 주로 간세포 내에서 cytochrome P4502B 유전자의 발현을 촉진하는 Phenobarbital의 매개체로서 알려져 있다. 다세포동물에서 각각의 분화된 세포는 독특한 유전자의 발현 Pattern을 갖고 있어서 어느 특정한 세포에서 일어나는 유전자의 발현특징이나 작용기전 혹은 기능이 다른 종류의 세포에서는 일어나지 않거나 상이한 기전에 의해서 조절된다. 이러한 세포간 특이성을 이용하여 유전자 발현에 관여하는 인자들을 규명하는데 기초적... -
Ectopic expression of Bcl-2 or Bcl-xL suppresses p-fluorophenylalanine-induced apoptosis through blocking mitochondria-dependent caspase cascade in human Jurkat T cells
한규현, 오현지, 전도연, 김영호, Han. Kyu-Hyun, Oh. Hyun-Ji, Jun. Do-Youn, Kim. Young-Ho 한국생명과학회 생명과학회지 10 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2003, Vol.13 No.1 118-127 (10 pages)
T 세포의 세포자살을 유도한다. FPA에 의한 세포자살에 미치는 Bcl-2 또는 Bcl-xL의 영향을 조사하기 위해, Bcl-2 또는 Bcl-xL을 stable transfection하거나 empty vectors만을 Transfection한 Jurkat 세포를 이용하여 FPA의 세포독성과 FPA에 의한 세포내 세포자살 신호전달경로를 비교 분석하였다. Jurkt T 세포에 0.63∼3.0 mLf의 FPA를 처리하였을 때 세포의 생육도는 농도에 비례하여 감소하였다. 또한 세포자살관련 DNA fragmentation, caspase-8 activatoin, Bid cleavage, mitochondria로 부터의 cytochrome c 방출, caspase-9 및... -
임파구 ADP-ribosyltransferase의 rat mammary adenocarcinoma cell에서의 발현
한국생명과학회 생명과학회지 1998, Vol.8 No.1 102-108 (7 pages)
알려진 signal sequence와 일치하였다. 미 transferase는 야생형의 cDNA로 transfection된 NMU (rat mammary adenocarcinoma) cell의 표면에 존재하였으며 phosphoatidylinosotol-specific phospholipase C에 의해 방출되어졌다. 카르복시 말단의 hydrophobic sequence가 없는 돌연변이체는 수용성이며 분비성인 transferase를 생산하였다. 이러한 사실은 카르복시 말단의 sequence가 없는 돌연변이체는 수용성이며 분비성인 transferase를 생산하였다. 이러한 사실은 카르복시 말단의 sequence가 GPI의 부착에 중요함을 나타내준다. -
Bradykinin Receptor의 발현에 미치는 녹농균유래 Nucleoside Diphosphate Kinase 및 Flagellin의 효과
김용재, 신희성, 하운환, Kim. Yong-Jae, Shin. Hee-Sung, Ha. Un-Hwan 한국미생물학회 미생물학회지 4 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2014, Vol.50 No.4 281-284 (4 pages)
관여하는 녹농균 유래인자에 대해서는 보고한 바가 없었다. 이번 연구에서는 녹농균에 의한 BR의 발현은 Type III secretion system (T3SS)이 관여하지만, 기존에 알려진 T3SS인자가 아닌 nucleoside diphosphate kinase (Ndk)에 의한 것으로 조사되었다. 하지만 pDNNDK를 이용한 transfection 실험 결과, Ndk 만으로는 BR의 발현이 유도되지 않았으며, Ndk와 함께 flagella가 필요함을 발견하였다. 이러한 결과는 기존에 보고된 주요 pathogen-associated molecular patterns (PAMPs)인 flagella와 더불어 감염대응에 관여하는 Ndk를... -
새로운 스트레스 단백질인 VISP의 세포내 위치
문창훈, 윤원준, 고명석, 김현주, 박정우, Moon. Chang-Hoon, Yoon. Won-Joon, Ko. Myoung-Seok, Kim. Hyun-Ju, Park. Jeong-Woo 한국미생물학회 미생물학회지 6 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2006, Vol.42 No.4 271-276 (6 pages)
enhanced green fluorescent protein (EGFP)이 붙은 fusion gene을 발현하는 plasmid를 제조하였다. EGFP-VISP를 발현하는 plasmid 벡터를 세포에 transfection 시킨 후 confocal microscope로 관찰한 결과 핵 주변에 점구조를 형성함이 확인되었다. VISP의 아미노산서열 중 핵 주변의 점구조 형성에 관여하는 부분을 확인하기 위하여 VISP의 다양한 deletion mutant들을 제조하였다. 이 mutant를 사용한 transfection 실험 결과 VISP의 C-terminal 부위(aa 612-710)가 핵주변의 점구조 형성에 중요한 역할을 담당함이 확인되었으며, 이... -
Bovine Vira1 Diarrhea Virus를 이용한 포유동물세포 발현벡터의 개발
한국미생물학회 미생물학회지 2002, Vol.38 No.2 86-95 (10 pages)
RNA의 자가복제 여부는 MDBK세포에 transfection시킨 후, $^{32}P$ 로 metabolically label함으로써 확인하였다. 또한, transfection된 세포에서의 바이러스 단백질 발현여부는 바이러스에 특이적으로 반응하는 anti-NS3 단클론항체를 사용하여 분석하였다. 또한, infectious CDNA clone을 응용하여 새로운 포유동물세포유전자 발현벡터의 개발을 위해서, 먼저 바이러스의 구조단백질이 바이러스의 자가복제에 필수적인 지를 평가하였다. 실험결과, 각각의 구조단백질 유전자를 deletion한 recombinant cDNA clone으로부터 합성된 viral... -
PRRS 바이러스 Nucleocapsid 단백질 인산화의 기능학적 연구
이창희, Lee. Chang-Hee 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2009, Vol.37 No.3 287-292 (6 pages)
조절되는지 살펴보았다. 하지만 본 연구의 결과들은 비인산화된 뉴클레오캡시드 단백질이 여전히 transfection된 세포의 핵 또는 핵인에서 발현되었고 더욱이 뉴클레오캡시드 자신과 dimer 형성을 할 수 있었다는 것을 보여주었다. 결론적으로 돼지 생식기호흡기증후군 바이러스 뉴클레오캡시드 단백질의 세포핵 내 수송 및 oligomerization 특성들은 인산화 비의존성으로 조절되는 것으로 보여 진다. 아마도 이 인산화 작용은 뉴클레오캡시드 단백질의 RNA-binding 특성등과 같은 다른 수준의 조절과 관련이 있는 것으로 추측되어 진다.