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호알카리성 Bacillus sp. YS-309로부터 $eta$-Galactosidase의 정제
유주현, 윤성식 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.6 587-592 (6 pages)
토양으로부터 분리한 호알카리성 Bacillus sp. YS-309의 조효소액을 조제하고 제핵산, ammonium sulfate 침전, DEAE-cellulose column chromatography, Sephacryl S-200 gel-filtration, DEAE-Sephadex A-50 chromatography 등을 단계적으로 수행하여 6.9배 정제된 순도 98%의 정제효소를 얻었으며, 활성염색을 실시하여 정제한 효소단백질이 $eta$-galactosidase임을 확인하였다. 정제효소의 분자량은 205,000으로 monomer의 분자량이 56,000인 동일크기의 tetramer로 구성되어 있다고 판단되었다. -
알칼리성 세균에 의한 글루탐산 생산에 관한 연구
조계란, 이강만, 배무 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 5 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.6 563-567 (5 pages)
알칼리성 세균으로부터 ammonium fumarate를 이용하여 글루탐산을 생성할 수 있는 균주를 분리, 동정하였으며, 글루탐산 생성에 미치는 여러가지 요인들과 생성기전에 관하여 조사하였다. 선택된 균주는 형태, 성질 등에서 Bacillus brevis와 유사하였다. 여러가지 배양조건 중에서 2% fumaric acid에 0.8% nutrient broth 를 첨가하고 암모니아수로 pH를 9로 조절한 배지에서 글루탐산 생성이 가장 좋았으며, 1% fumaric acid로부터 글루탐산으로의 전환율은 약 22%였다. 생성기전을 알아보기 위한 실험에서 whole cell을 이용하였을 때... -
Alkalophilic Bacillus circulans가 생산하는 Cyclodextrin Glucanotransferase 의 정제와 효소반응특성
신현동, 이상호, 이용현 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 9 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.4 370-378 (9 pages)
토양으로부터 역가높은 CGTase를 분비하는 호알칼리성 미생물을 분리하였으며, 동정 결과 Bacillus circulans로 판정되었다. 배양액 중의 CGTase를 ammonium sulfate 침전, DEAE-Sephadex 그리고 Sephadex G-100 column chromatography로 분리, 정제하여 단일 단백질 band를 얻었다. 정제된 CGTase의 분자량은 약 93,000, 최적 pH와 온도는 6.0, $50^{circ}C$였으며, pH와 온도안정성은 5.5-11, $65^{circ}C$까지였다. Soluble starch를 기질로 할 때의 $V_{max}$ 와 $K_{m}$ 값은 각각 0.16$mu$mole $eta$-CD/min, 14.3mg soluble... -
Streptomyces GI 32 방선균의 Glucose Isomerase 생산과 효소특성
서형주, 김진만, 이태경, 양한철 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 4 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.3 198-201 (4 pages)
Steptomyces sp. GI 32의 glucose isomerase 생산은 sorbitol 1%, yeast extract 0.4%, tryptore 0.6%, 1 mM Fe$_2$(SO$_4$)$_3$의 조성을 가진 배지에서 초기 pH 7.0으로 조절하여 35$^{circ}C$에서 약 18시간 진탕배양시 효소생산량이 최고로 240 units/mg이었다. 효소는 ammonium sulfate 분획, DEAE cellulose chromatography 등의 과정을 거쳐 부분정제한 결과 3배정도 효소 비활성이 증가하였다. 효소활성의 치적온도는 7$0^{circ}C$이며, 최적 pH는 8.0이었다. 특히 효소의 열안정성이 7$0^{circ}C$에서 1시간 가열하여도 전혀... -
Streptococcus thermophilus 510에 의한 $eta$-Galactosidase의 생산, 정제 및 특성
강국희, 박신인 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 11 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.1 35-45 (11 pages)
pH7.0, 배양온도 37$^{circ}C$, 배양기간 18시간이었다. 배양여액으로부터 $eta$-galactosidase를 ammonium sulfate 분획, 핵산의 제거, Sephadex G-200 gel filtration 및 DEAE-Sephadex A-50 ion exchange chromatography 등의 4단계 정제과정을 거쳐 정제한 결과 18배 정제되어 단일 단백질로 분리되었다. 정제효소의 활성 최적온도는 5$0^{circ}C$, 최적 pH는 7.0이었고, 효소활성이 Mn$^{2+}$, $K^+$과 같은 금속이온과 dithiothreitol, 2-mercaptoethanol에 의해 촉진되었고, Hg$^{2+}$, $Zn^{2+}$, Co$^{2+}$, $Ca^{2+}$, EDTA,... -
DEAE-Trisacryl 크로마토그래피법에 의한 IgG1 Type 쥐 단일클론 항체의 분리정제
최태부, 정용근 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.5 335-342 (8 pages)
용출하였다. 혈청농도가 높은 배지 (10% FBS)에서는 50% ammonium sulfate 처리로 90% 이상의 항체가 회수되었으나 저혈청 배지 (2% FBS)에서는 60% ammonium sulfate 처리에도 회수율이 84%에 그쳤다. 후자의 경우 한외여과법 (ultrafiltration)을 이용하여 항체 회수율을 91%까지 증가시킬 수 있으나 농축된 항체를 크로마토그래피로 정제하였을 때 그순도가 ammonium sulfate 침전법에 비해 낮아졌다. 하이브리도마 Alps 25-3, HCGK, A4W, KW를 여러가지 배양조건에서 배양한 뒤 생산된 항체를 DEAE-Trisacryl M chromatography를... -
Pseudomonas sp.가 생산하는 Inulinase에 관한 연구 -효소의 정제와 성질 -
이태경, 최용진, 양한철 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.4 259-264 (6 pages)
Pseudomonas sp.로 동정된 토양분리균의 inulinase를 ammonium sulfate 분획, DEAE Sephadex A-50 Chromatography, Sephadex G 100 및 Sephadex G200 gel여과 등의 과정을 거쳐 정제 한 결과 inulinase PI과 PII의 두 isoenzyme으로 분리되었으며 각각 약 24배와 17배 정제되어 단일단백질로 분리되었다. PI, PII 두 isoenzyme은 다같이 sucrose, raffinose 및 levan은 분해하지 못하고 inulin만을 endo-type로 분해 절단하는 $eta$-2,1-fructanfructano hydrolase(EC 3.2.1.7)임이 밝혀졌다. 효소활성 최적온도는 두 효소가 같은데 비해... -
Cellulomonas sp. CS1-1으로 부터의 $eta$-Glucosidase의 합성조절과 그의 효소학적 성질
이희순, 민경희, 배무 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 7 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.2 119-125 (7 pages)
효소생성을 현저히 유도하였으므로, 이 효소는 inducible enzyme임을 알 수 있었다. 효소생성에 미치는 질소원을 조사한 결과는 yeast extract가 peptone이나 ammonium sulfate보다 효소생성을 증가시켰다. 효소의 특성을 조사한 결과, 50mM MgCl$_2$가 포함된 10mM potassium phosphate buffer (pH 7.0)에서 효소의 역가가 증가하였고, 최적 pH는 6.0이었고 최적온도는 42$^{circ}C$ 이었다. p-nitrophenyl-$eta$-D-glucoside의 농도에 대한 glucose의 Km값은 0.265mM 이었고 $eta$-D(+)-glucose에 대한 Ki값은 9.0 mM 이었다. -
Saccharomycopsis lipolytica Isocitrate Lyase의 정제와 성질
조석금 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 5 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1987, Vol.15 No.6 420-424 (5 pages)
Saccharomycopsis lipolytica ATCC 44601 과 MX9-11RX8 온도감수성 변이균주의 isocitrate lyase는 조추출액을 ammonium sulfate 분획, Toyo Peal HW-55F gel filtration, DEAE-Cellulose ion exchange chromatography 등의 방법에 의하여 각각 54배, 87배 분리 정제되었다. 정제효소의 subunit 분자량은 59,000이고 Sephadex G-200 gel filtration에 의한 native enzyme 은 230,000이므로 이 효모의 isocitrate lyase는 같거나 비슷한 subunit 4개로 구성된 tetramer이며, 최적 pH는 6.9이었다. -
Bacillus sp. 의 Cyclodextrin Glucanotransferase 생산 및 이용에 관한 연구
오평수, 고성철, 서항원 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1986, Vol.14 No.6 461-466 (6 pages)
pH 6-10 범위에서 안정하였다. 효소생산조건은 탄소원으로 corn starch 1%, 질소원으로서 corn steep liquor 5%, urea 0.1%, ammonium sulfate 0.25%를 동시에 첨가하는 것이 가장 양호하였으며 본 생산균을 30$ell$ jar fermentor로 3$0^{circ}C$, 200rpm, 0.6vvm에서 60시간 정도 배양하였을 때 최대의 효소 생산력을 나타내었다. 또한 본 효소를 이용하여 stevioside를 acceptor로 하고 전분가수분해물을 donor로 하여 당전이반응을 실시한 결과 상당한 전이효과가 나타났으므로 기타 전이제품 및 cyclodextrin 생산에 응용이 가능할...


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