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Bacillus subtilis YG-95가 생산하는 protease의 정제와 특성
변영각, 김성호, 주현규, 이갑상, 임무현, Byun. Young-Gag, Kim. Seong-Ho, Joo. Hyun-Kyu, Lee. Gap-Sang, Yim. Moo-Hyun 한국응용생명화학회 한국농화학회지 6 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1998, Vol.41 No.5 349-354 (6 pages)
Bacillus subtillis YG-95가 생산하는 protease를 ammonium sulfate$(35{sim}85%)$ precipitation, DEAE-separose 6B, sephadex G-100을 통해 분리, 정제하였고 정제된 효소의 특성을 조사하였다. SDS-PAGE로 확인된 효소의 분자량은 약 43 kilodalton이었다. 효소반응의 최적 pH 및 최적온도는 각각 약 pH 10.0와 $55^{circ}C$이었으며, 효소는 $pH;5{sim}12$ 까지 넓은 pH범위에서 안정성을 보였고, $45^{circ}C$까지의 온도에서 안정하였다. 본 효소는 $Fe^{3+}$와 $Al^{3+}$에 의해서 활성이 저해되었으며, 저해제 중에서는... -
폐단백자원에 이용하기 위한 미생물 Protease의 특성
천성숙, 조영제, 성태수, 손준호, 최청, Chun. Sung-Sook, Cho. Young-Je, Sung. Tae-Soo, Son. Jun-Ho, Choi. Cheong 한국응용생명화학회 한국농화학회지 7 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1998, Vol.41 No.1 6-12 (7 pages)
arabinose, 0.5% polypepton, 0.1% ammonium sulfate, 0.1% magnesium chloride 첨가로 3 일 배양이었다. 효소는 ion exchange chromatography, gel filtration 등으로 16.9 배 정제할 수 있었으며 비활성역가는 340.4 unit/mg이었다. 정제효소는 polyacryl amide gel 전기영동상 단일 밴드로 나타났으며, 분자량은 30,000 정도로 추정되었고 결정구조는 모서리가 둥그스럼한 막대 모양이었다. 정제 효소의 최적작용 pH와 온도는 9.0, $60^{circ}C$였으며, pH 7.0-12.0까지 $50^{circ}C$에서 안정하였다. 금속이온중 $Na^+$, $Mg^{2+}$,... -
Bacillus brevis CD162 Cyclodextrin Glycosyltransferase의 정제 및 특성
김명희, 임영희, 오태광, 손천배, Kim. Myung-Hee, Lim. Young-Hee, Oh. Tae-Kwang, Sohn. Cheon-Bae 한국응용생명화학회 한국농화학회지 7 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1997, Vol.40 No.6 465-471 (7 pages)
Bacillus brevis CD162가 생산하는 cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase)를 ammonium sulfate 침전, DEAE-Sephadex CL-6B 및 Sephadex G-150 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 분리정제하였다. 정제된 CGTase는 분자량이 약 74,000, 등전점은 약 6.3인 단백질이었고, 정제된 단백질을 SDS-PAGE한 후 변성된 단백질을 재활성시켜 zymogram을 수행한 결과 cyclodextrin glycosyltransferase임을 확인할 수 있었다. 이 효소의 최적활성 pH와 온도는 각각 8.0과 $55^{circ}C$이었으며, pH $5.5{sim}9.0$과 $50^{circ}C$까지 안정한... -
곤충 병원성 곰팡이 Beauveria bassiana로부터 Protease의 정제와 특성
고휘진, 김현규, 김범기, 강선철, 권석태, Ko. Hwi-Jin, Kim. Hyun-Kyu, Kim. Beom-Gi, Kang. Sun-Chul, Kwon. Suk-Tae 한국응용생명화학회 한국농화학회지 7 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1997, Vol.40 No.5 388-394 (7 pages)
곤충 병원성 곰팡이 Beauveria bassiana ATC7159의 배양여액으로부터 균체외 protease (basiasin I)를 Ammonium sulfate 침전, DEAE-Sephadex A-50, CM-cellulose 및 Hydroxyapatite column chromatography를 수행하여 완전히 정제하였다. 이 과정으로 41배 정제되었으며 정제수율은 13.6%였다. 정제된 bassiasin I의 분자량은 SDS-PAGE 상에서 약 32,000 Da이며 pI값은 9.5로 확인되었다. $NH_2$ 말단 아미노산 서열은 다른 곤충 병원성 곰팡이가 생산하는 pretense들과 높은 상동성을 보였다. Protease 활성의 최적 pH는 10.5 부근이며,... -
호박$(Cucurbita;moschata;D_{UCHESNE})$잎에서 리보즘불활성화 단백질의 분리 및 특성
이시명, 김영태, 황영수, 조강진, Lee. Si-Myung, Kim. Yeong-Tae, Hwang. Young-Soo, Cho. Kang-Jin 한국응용생명화학회 한국농화학회지 5 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1997, Vol.40 No.5 375-379 (5 pages)
리보즘불활성화 단백질(Ribosome-inactivating protein, RIP)을 생성하는 식물을 탐색하여 그중 호박$(Cucurbita;moschata;D_{UCHESNE})$ 잎에서 ammonium sulfate 침전, DE 52-Cellulose, S-Sepharose, FPLC Superose 12 HR, FPLC Mono-S column chromatography에 의하여 ribosome-Inactivating 활성이 있는 단백질(PR 1, PRIP 2)을 분리하였다. 정제된 단백질의 분자량은 SDS-PAGE에서 약 31,000과 30,500인 염기성 단백질로서, 특히 PRIP 1은 열에도 안정하여 $50^{circ}C$에서 30분간 처리한 경우에도 활성이 유지되었다. 이... -
호알칼리성 Coryeform bacteria TU-19가 생산하는 세종류의 균체외 단백질분해호소의 정제
최명철, 양재섭, 강선철, Choi. Myoung-Chul, Yang. Jae-Sub, Kang. Sun-Chul 한국응용생명화학회 한국농화학회지 7 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1995, Vol.38 No.6 534-540 (7 pages)
이 효소들을 정제하기 위해서 ammonium sulfate fractionation, gel filtration 및 QAE-Sephadex column chromatography 등을 순차적으로 행하였다. 그 결과 이들 세종류의 효소는 SDS-PAGE pattern으로 평가했을 때 single band로 순수 정제되었으며, 각각의 분자량은 120, 80, 45 kDa이었다. 정제된 효소의 특성을 살펴보면 Pretense I과 II의 최적 pH와 온도는 각각 $10.5,;45^{circ}C$이었으며, Protease III는 11.0과 $50^{circ}C$로 나타났다. 또한 이들 세효소는 10 mM PMSF 농도에서 효소활성을 완전히 상실하였으며, pCMB,... -
주목 (Taxus cuspidata) 세포배양에서 질소원, 인산, 세포고정화가 Taxol 생산에 미치는 영향
박종화, 정인식, Park. Jong-Hwa, Chung. In-Sik 한국응용생명화학회 한국농화학회지 5 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1995, Vol.38 No.4 308-312 (5 pages)
주목 (Taxus cuspidata) 세포배양을 이용하여 modified B5 배지중의 질소원, 인산 그리고 세포 고정화가 세포생장과 taxol 생산에 미치는 영향을 살펴보았다. Nitrate와 ammonium의 비는 세포생장 및 taxol 생산에 있어 중요한 인자임을 알수 있었고 비값이 1인 경우는 modified B5 배지 조성중 원래 비값인 20에 비해 taxol 생산을 10배나 증가시켰다. 인산의 농도를 감소시킨 경우 세포생장은 저하되었지만 taxol 생산은 현저하게 증가하였다. 고정화세포는 ${sim}120;g/l$의 taxol을 생산하였다. -
Aeromonas salmonicida YA7-625가 생산하는 Chitobiase의 순수분리와 특성
이강표, 김동섭, 윤성식, 오두환, Lee. Kang-Pyo, Kim. Dong-Seob, Yoon. Sung-Sik, Oh. Doo-Hwan 한국응용생명화학회 한국농화학회지 5 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1993, Vol.36 No.4 255-259 (5 pages)
키틴 분해 효소활성이 높은 균주로 분리동정한 Aeromonas salmonicida YA7-625의 chitobiase를 ammonium sulfate침전, affinity adsorption, DEAE-cellulose chromatography, hydroxylapatite chromatography, gel filtration 과정을 통해 수율 47.2% 및 정제도 31.5로 분리, 정제 하였다. 정제된 chitobiase는 pH6.0, $40^{circ}C$에서 최대의 활성을 나타내었고 분자량은 15,000 daltons로 추정되었다. 금속이온과 저해제들의 효과를 검토결과 효소의 활성에는 cystein, glutamic acid, aspartic acid, serine, tryptophan 및 tyrposine... -
Pseudomonas sp. YD-15가 생산하는 CMCase의 특성
이정우, 김창남, 허남윤, 오두환, Lee. Jeong-Woo, Kim. Chang-Nam, Hur. Nam-Yun, Oh. Doo-Hwan 한국응용생명화학회 한국농화학회지 6 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1992, Vol.35 No.3 173-178 (6 pages)
$30^{circ}C$에서 $60{sim}80$시간 배양 하였을 때 최대 효소생산을 보였으며, 배양액으로부터 85% ammonium sulfate 침전, DEAE-Sepharose CL-6B chromatography, Sephadex G-100 gel filtration 과정을 통하여 14%의 수율로 정제도 15.3배의 효소단백질을 얻었다. 정제효소의 최적 작용 pH는 6.0 이었고 pH $5.0{sim}8.0$ 사이에서 안정하였다. 최적 작용온도는$50^{circ}C$였으며, $50^{circ}C$까지는 안정하였다. 효소의 분자량은 약 100,000으로 추정되었으며, 기질인 carboxymethylcellulose(CMC)에 대한 Km 값은 40mg/ml 이었다. -
Saccharomyces sake KBA No. 6에 의한 Ergosterol의 생산
박장우, 이왕식, 방원기, Park. Jang-Woo, Lee. Wang-Sik, Bang. Won-Gi 한국응용생명화학회 한국농화학회지 6 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1990, Vol.33 No.1 87-92 (6 pages)
Ergosterol을 생산하기 위하여 Saccharomyces sake KBA No. 6가 사용되었으며 ergosterol축적에 관여하는 각종 요인들이 검토되었다. 가장 효율적인 무기 질소원은 ammonium chloride이었으며, C/N 비율이 200/l이었을 경우 3.5%의 ergosterol이 세포 내에 축적되었다. Tween 80 0.2 %와 potassium nitrite 0.1 %를 동시에 사용하였을 경우, ergosterol 함량(%) 과 총 ergosterol량(mg/L)은 각각 56 %와 45% 증가하였다. 최적조건에서 ergosterol 함량은 1.73%에서 5.3%로 증가하였으며, 총 ergosterol량은 65.2 mg/L에서 135.15 mg/L로...


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