본 연구는 알킬화제이며 항암항생제인 Mitomycin C(MMC)와 Bleomycin(BLM)이 DNA 복제 및 회복에 미치는 영향을 규명하고, 아울러 MMC에 의한 "유발상해회복"이 포유동물세포에 유발되는지 밝히고자 수행하였다. 이를 위해 자기방사법에 의한 비주기 DNA 합성율과 알카리 유출법에 의한 DNA단사절단율을 측정하였다. CHO세포에 MMC를 제 1차 $(MMC_1)$ 처리한 후 5시간 뒤에 제 2차 $(MMC_2)$로 처리하여 얻은 결과는 다음과 같았다. 1. BLM은 비주기 DNA합성을 매우 적게 유발시켰으며, BLM $5\mug/ml$의 농도에서 부터 비주기 DNA합성율은 증가를 보이지 않았다. BLM은 처리후 1.5시간까지 DNA합성억제를 보였으며, 1.5시간후 DNA합성율이 증가되었으나, 대조군의 60% 수준까지 회복되었을 뿐이다. 2. MMC에 의해 유발된 비주기 DNA합성은 농도에 따라 비례하였으며, 배양후 시간의 간격에 따라 비례하여 감소하였다. 제 1,2차 MMC를 처리한 세포의 비주기 DNA합성은 제 1차만 처리한 세포의 비주기 DNA합성보다 많았다. 3. 알카리 유출법 결과는 MMC에 의하여 유발된 DNA 단백질 연결로 인한 DNA 단사절단율이 농도에 비례함을 나타내었다. DNA 단백질 연결로 인한 DNA 단사절단율은 배양후의 시간에 비례해서 감소되었다. 이러한 결과는 MMC와 BLM 모두가 DNA 상해제임과 MMC에 의한 DNA 상해 부위의 복제율이 어떠한 유발기작에 의하여 촉진됨을 시사한다.촉진됨을 시사한다.
Alkaline elution profiles showed that the frequency of DNA single strand breaks associated with DNA-protein crosslinks in cells treated with both an inducing dose of MMC $(MMC_1)$ and a challenge dose of MMC $(MMC_2)$ was slightly less than that in cells treated with MMC alone. The amount of unscheduled DNA synthesisi in cells treated with both $MMC_1$ and $MMC_2$ was greater than that in cells treated with MMC alone. This enhancement of exicision repair detected by UDS autoradiography and alkaline elution, was not observed, when cells were incubated with cyclohexmide between the two treatments of $MMC_1$ and $MMC_2$. These results suggest that MMC-damaged DNA from Chinses hamster cells is repaired by excision repair mechanisms that require de novo protein synthesis for enhancement, and that an inducible repair mechanism may exist in CHO cells.
