메탈로사이오닌(MT)의 mRNA을 쥐 간으로부터 28배 정제 했으며 그의 단백질 생합성 능력을 번역을 통하여 식별하였다. 세포내의 모든 RNA는 카드뮴을 주사한 쥐의 간으로부터 guanidinium thiocyanate방법으로 추출하였으며, oligo(dT)-cellulose 친화성 크로마토그래 리법을 이용하여 mRNA을 분리하였다. MT-mRNA의 단백질 합성 능력을 검사하기 위하여 토끼의 reticulocyte와 밀배알을 이용하였으며, 각각 단백질 합성에 대한 최적 조건을 조사하였다. MT생합성에 대해 mRNA의 양은 $1;{mu}g$까지 비례했으며 마그네슘은 4-5 mM, 그러고 칼륨 농도는 75-85 mM가 가장 적당한 단백질 합성 조건이었다. [$^{35}S$]-메사이오닌으로 치환된 합성 단백질은 전기영동 한 후 과산화수소수로 젤을 녹여 방사능을 측정하는 방법과 형광 투시법에 의해 분석하였다. MT-mRNA는 추출된 모든 mRNA중 reticulocyte로 조사한 경우 약 16%, 밑 배알로 조사한 경우 약 30%로 나타났다.
Metallothionein(MT) messenger RNA was purified 28-fold from rat liver and was identified by its ability for the protein biosynthesis in cell-free translation systems. Total cytoplasmic RNA was extracted from the Cd injected rat liver by guanidinium thiocyanate method. The total RNA was further fractionated by oligo(dT)-cellulose affinity chromatography. For cell-free biosynthesis of MT-mRNA, rabbit reticulocyte lysate and wheat germ lysate were tested and established the optimal translational conditions for MT-mRNA. The incorporation of [$^{35}S$]-methionine into MT was a linear function of the amount of poly($A^+$) RNA up to $1;{mu}g$. 4-5 mM $Mg^{2+}$ and 75-85 mM $K^+$ were found to be the optimal conditions for the MT biosynthesis. Analysis of labelled product was carried out by SDS-PAGE and the gel was analyzed by $H_2O_2$ gel solubilization and fluorography methods. The activity of MT-mRNA was approximately, 16% and 30%, of the total RNA in the reticulocyte lysate and wheat germ system, respectively.
