- Acinetobacter calcoaceticus에 의한 Malonate Uptake
- Malonate Uptake by Acinetobacter calcoaceticus
- ㆍ 저자명
- 임국진,김유삼,Lim. Kook-Jin,Kim. Yu-Sam
- ㆍ 간행물명
- 한국생화학회지
- ㆍ 권/호정보
- 1987년|20권 3호|pp.286-292 (7 pages)
- ㆍ 발행정보
- 생화학분자생물학회
- ㆍ 파일정보
- 정기간행물| PDF텍스트
- ㆍ 주제분야
- 기타
malonate를 유일한 탄소원으로하여 배양한 Acinetobacter calcoaceticus에 의한 malonate uptake의 최적온도는 $30^{circ}C$이었고 최적 pH6.5이었다. 또 malonate uptake의 속도는 malonate의 농도에 따라서 60mM 까지는 급격히 증가되었으나 그 이상의 농도에서는 오히려 감소되었다. 이 결과들을 Lineweaver-Burk의 방법에 따라서 plot한 결과 Km은 25mM 이었고 $V_{max}$는 $3.1;{mu}mol/min/mg{cdot}cell$ (dry wt)이었다. Acetate나 succinate 또는 Luria Burtani 배지에서 배양한 세포들에 의한 malonate uptake는 대단히 낮았다. 또 malonate에서 배양한 세포에 의한 malonate의 uptake는 여러 가지 mono-, di- 또는 tin carboxylate들에 의하여 방해를 받았으며 그들중 acetate는 비경쟁적으로, succinate는 경쟁적으로 방해를 하였다. 그러나 succinate에서 배양한 세포에 의한 malonate uptake를 통하여 볼때 malonate uptake를 위하여 특수한 uptake system이 유도됨을 알 수 있었다. 그리고 osmotic shock에 의해서 malonate uptake가 크게 영향을 받지 않으며, arsenate에 의 하여는 아주 약하게, azide, cyanide와 2,4-dinitrophenol에 의하여는 대단히 심하게 영향을 받았다. 이것은 이 uptake가 ion gradient에 의해서 얼어나는 현상임을 예측하게 하였다. 또 malonate에서 배양한 세포에서 제조한 membrane vesicle 과의 실험을 통하여 malonate uptake는 일종의 proton gradient에 의해서 일어나며 세포막에 이와 관련된 막단백질이 유도되는 것으로 판단된다.
Malonate uptake by Acinetobacter calcoaceticus grown on malonte was dependent on temperature with $30^{circ}C$ optimum, pH with 6.5 optimum and the concentration of malonate, indicating that the bacteria may take up malonate by a specific carrier system. The rate of malonate uptake by malonate-grown cell was largely increased with increasing concentration of malonate upto 60 mM and then decreased. Km and $V_{max}$ obtained from the Lineweaver-Burk plot of the rate were 25 mM and $3.1;{mu}mol/min/mg$ of the cell (dry wt), respectively. The rate of malonate uptake by acetate- or succinate- or Luria Burtani medium-grown cell was considerably lower than that by the malonate-grown cell. The uptake was inhibited by the addition of mono- or di- or tri-carboxylates, such as acetate, propionate, pyruvate, succinate, malate, oxaloacetate, oxalate, citrate and isocitrate in a different strength. The malonate uptake was completely inhibited by 2 mM azide, 2 mM cyanide or 2 mM 2,4-dinitrophenol, whereas it was slightly inhibited by arsenate at the same concentration, indicating that an ion gradient may be important for the uptake. Furthermore, the membrane vesicle prepared from the bacteria grown on malonte took up malonate and the rate of uptake was dependent on $Delta$ pH. The membrane also contained a protein not shown in the membranes prepared from the cells grown on acetate or succinate. These results are consistent with, though they do not definitely prove, the energization of malonate uptake through an inducible carrier system by a proton gradient.