Glycinin은 대두의 주된 저장 단백질이다. Glycinin 분자는 6개의 subunit으로 이루어져 있으며, 각 subunit은 산성 및 염기성 polypeptide로 구성되어 있다. 이들 polypeptide는 전구체로 합성되어진 후 내부 절단에 의해 산성 및 염기성 polypeptide로 갈라진다. Glycinin 유전자의 구조와 발현 메카니즘을 규명하기 위해 cDNA 유전자 발현 은행을 제조한 후, 항체를 사용한 면역 선별법에 의해 cDNA 유전자를 선별하였다. cDNA 유전자 발현 은행은 mRNA를 이용하여 double stranded cDNA를 합성한 후 ${lambda}$gt11 발현 운반체에 삽입 제조하였다. 항체는 glycinin 산성 및 염기성 polypeptide 각각에 대한 것을 사용했는데, 이들의 항원은 mRNA 에서 합성된 전구체 단백질의 N-terrninal과 C-terminal 에 해당한다. 8개의 cDNA clone을 분리하였는데 4개는 산성 polypeptide에 대한 항체, 4개는 염기성 polypetide에 대한 항체에 의해 선별된 것이다. 염기서열을 결정한 결과, 그 중 cDNA 길이가 1185 bp인${lambda}$G1A1 clone 은 glycinin $A_2B_{1a}$ subunit을 code하는 cDNA 유전자의 부분 clone임을 알았다. 이 clone은 산성 polypeptide의 절반과 염기성 polypeptide의 전부에 해당하였다. 이 cDNA 유전자에 해당하는 mRNA의 크기는 약 1.8 kb 임을 Northem blot 결과 알 수 있었다. Glycinin 유전자는 대두 종자에서만 발현이 되었으며, 이러한 조직 특이성 발현 형태는 transcription 단계에서 조절이 이루어지는 것을 알 수 있었다.
Glycinin is the most abundant storage protein in soybean. A molecule of glycinin is composed of 6 subunits each of which consists of two different kinds of polypeptides, acidic (A) and basic (B) one. These polypeptides are synthesized as a precursor which is cleaved to yield A- and B-polypeptides. To study the structure and expression mechanism of the gene, isolation of cDNA clones for soybean glycinin was attempted by immunological screening of a soybean cDNA library with antibodies. The cDNA expression library was constructed with double stranded cDNA of polyadenylated mRNA into ${lambda}$gt11 expression vector. Antibodies to A- and B-polypeptides of glycinin subunit which correspond to N- and C-terminal domain of mRNA translate, respectively, were employed. Eight clones for glycinin, 4 with anti-A and 4 with anti-B polypeptide antibody, were isolated by immunoscreening. The clone ${lambda}$G1A1 with 1186 bp insert was characterized to be a partial cDNA clone for glycinin subunit $A_2B_{1a}$ by nucleotide sequencing analysis and the expression in E. coli. It encodes a half of $A_2$- and entire $B_{1a}$-polypeptide. The mRNA size of glycinin was demonstrated to be 1.8 kb by Northern blot analysis. It was expressed only in seeds maintaining tissue-specific expression pattern, which was controlled at the level of transcription rather than at translation.
