효모에 있어서 threonine과 methionine 생합성에 관여하는 효소들 중 하나인 homoserine dehydrogenase가 식물체내로 도입된 후, 그 역할을 조사하고자 Ti plasmid에서 유도된 pGA658 vector와 homoserine dehydrogenase 유전자 함유 DNA의 재조합을 시도하였다. 그 결과 pGA658 vector의 nos promoter 다음에 효모의 homoserine dehydrogenase 유전자를 함유한 DNA 절편이 방향이 반대로 삽입된 재조합 plasmids가 성공적으로 만들어졌다. 형질전환된 E. coli와 Agrovbacterium tumefaciens는 적절한 항생물질 함유배지에서 저항성을 나타내었으며, 그들의 plasmid를 분리하여 여러가지 제한효소를 이용한 크기를 조사해 보니, 예상되는 크기와 일치하는 것을 관찰할 수 있었다. 또한 형질전환된 E. coli와 A. tumefaciens내에서의 yeast homoserine dehydrogenase 유전자 발현을 조사하기 위해 그 효소의 활성을 조사해 본 결과, 형질전환된 E. coli에서는 대조군에 비해 약간의 증가를 나타내었으나, 형질전환된 A. tumefaciens에서는 변화가 없었다.
DNA recombination using plasmid pGA658, a Ti plasmid vector, was tried to study the role of yeast homoserine dehydrogenase after introducing its gene into plant cells. Two recombinant plasmids with opposite orientation of the gene DNA under nos promoter of vector pGA658, pKDB1 and pKDB2, were constructed by the aid of two intermediate vectors, pUC7 and pUC119. Transformed E. coli and Agrobacterium tumefaciens were confirmed by the resistance to appropriate antibiotics and by sizing DNA restriction fragments after plasmid isolation. Assay of homoserine dehydrogenase activity showed that a little increase in its activity was detected in transformed E. coli, but no increase in transformed Agrobacterium tumefaciens, compared with its untransformed strain.
