- Bacillus sp.가 세포외로 생산하는 Inulinase의 정제 및 특성
- ㆍ 저자명
- 김경남,최용진
- ㆍ 간행물명
- 산업미생물학회지
- ㆍ 권/호정보
- 1990년|18권 5호|pp.490-495 (6 pages)
- ㆍ 발행정보
- 한국미생물생명공학회
- ㆍ 파일정보
- 정기간행물| PDF텍스트
- ㆍ 주제분야
- 기타
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토양 분리균인 Bacillus spp.가 생산하는 inulinase를 ammonium sulfate 분획, 열처리, DEAE Sephadex Cl-6B ion exchange chromatography, Sephadex G-100 및 Sephadex G-150 gel 여과 등의 과정을 거쳐 단일 단백질로 분리 정제하였다. 정제 inulinase는 분자량이 약 56,000인 효소로서 pH6.0,$50^{circ}C$에서 최대 활성을 나타내었으며 $Co^{2+}$와 $Mn^{2+}$에 의해서 현저한 활성화 효과를 보였다. 또한 본 효소는 sucrose와 raffinose에 대해서도 높은 활성을 나타내므로 $eta$-D-fructofuranosidase(EC 3.2.1.26)로 분류되는 exo-inulinase인 것으로 확인되었다. 한편 효소활성에 필수적인 아미노산 잔기는 tryptophan과 histidine인 것으로 분석되었으며 inulin과 sucrose에 대한 $K_m$값은 각각 $2.0 imes 1.0^[-3}M, 1.0 imes 10^[-2}M$로 산출되었다.
The extracellular inulinase from Bacillus spp. was purified to a single protein through a sequence of operations including ammonium sulfate fractionation, heat treatment, DEAE Sepharose C1-6B ion exchange chromatography, Sephadex 6-100 and Sephadex 6-150 gel filtration. The purified enzyme was confirmed to be a $eta$ -D-fructofuranosidase(EC 3.2.1.26) which was much more active on sucrose than on inulin(I/S = 0.2). The maximal inulinase activity was observed at pH 6.0 and at the temperature of $50^{circ}C$. The mo1ecular weight of the enzyme was about 56, 000. Tryptophan and histidine residues of the enzyme molecule were found to be essential for its catalytic activity.