인체 알파원앤티트립신 cDNA 서열을 효모 Saccharomyes cerevisiae에서 GAL10-CYC1 하이브리드 프로모터의 조절하에 발현시켰다. $Gal^+$ 숙주 균주는 각각 다른 유전자에 변이가 생긴 두 개의 $Gal^-$ 균주를 교배하여 얻은 이배체를 사포자분석하여 얻었다. 상기의 균주 KY8을 발현벡터 pGAT7로 형질전환시키고 갈락토스배지에서 알파원앤티트립신의 발현을 유도한 결과 일레스타제의 저해활성 및 면역블랏법으로 그 생산을 확인할 수 있었다. 효모에서 생산된 재조합 알파원앤티트립신의 분자량은 약 44 kDa로서 이는 알파원앤티트립신 구조유전자의 cDNA 서열로부터 예측한 바와 같다.
Human ${alpha}1$-antitrypsin cDNA was expressed in yeast Saccharomyces cerevisiae under the regulation of GAL10-CYC1 hybrid promoter. A suitable $Gal^+$ host strain was constructed by tetrad analysis of a diploid from a cross of two $Gal^-$ strains, each affected in a different galactose utilizing gene. The resulting strain KY8 was transformed with the expression plasmid pGAT7 and the synthesis of ${alpha}1$-antitrypsin was induced in galactose medium. Production of ${alpha}1$-antitrypsin in recombinant yeast cells was confirmed by an elastase inhibitory assay and an immunoblotting method. The molecular weight of recombinant ${alpha}1$-antitrypsin synthesized in yeast was 44 kDa which was expected from the full length cDNA sequence of the ${alpha}1$-antitrypsin structural gene.
