대장균 JM109 균주에서 B형 간염 바이러스의 X 부위가 연결된 재조합 융합베타갈락토시다제를 발현시켰을 때 베타갈락토시다제 효소생산은 온도에 민감하게 반응하였다. 높은 온도에서는 효소생산량이 저하되었는데, 이는 융합폴리펩티드의 생산이 감소되어서가 아니라 폴리펩티드들이 세포내에서 응집되었기 때문이다. 하지만 낮은 온도 $(17^{circ}C)$에서 제대로 폴딩된 단백질은 높은 온도$(37^{circ}C)$에서도 활성을 그대로 유지하였다. 세포내에서 일단 생성된 단백질 응집물은 배양온도를 낮추어도 활성이 있는 상태로 돌아갈 수 없었다. 이러한 결과로 미루어 볼 때 응집현상은 native 상태의 단백질이 열에 의한 변성에 의해 유도되는 것이라기 보다는 높은 온도에서 폴리펩티드폴딩이 제대로 진행되지 못한 결과라 할 수 있겠다.
Recombinant Escherichia coli JM109 cells expressing ${eta}$-galactosidase fused with X open reading frame of hepatitis B virus exhibited temperature sensitive production of ${eta}$-galactosidase. Decrease in activity at high culture temperature $(37^{circ}C)$ was not due to the decrease in fusion polypeptide production per se, but rather due to aggregation of the fusion polypeptides within the cells. However once the fusion polypeptides folded into proper conformation at low culture temperature $(17^{circ}C)$, they maintained the activity even at high temperature $(42^{circ}C)$. Aggregates of the fusion polypeptides did not convert to active form when the culture temperature was lowered. The results indicate that aggregation is not a consequence of thermal denaturation of native structure but of incorrect folding and assembly of the polypeptides at high culture temperature.
