농도기울기 폴리아크릴아미드 전기영동을 이용하여 N-acetylchitohexaose-형광기 결합체에 작용하여 얻어지는 chitinase 생성물을 분석하였다. N-Acetylchitooligosaccharides는 7-amino-1,3-naphthalene disulfonic산과 환원성 아민화반응에 의해서 결합되어졌다. 각각의 소당-형광기 결합체는 농도기울기 폴리아크릴아미드 전기영동과 양이온 나일론 막으로 전기적 전이에 의해서 정제되어졌다. 나일론 막에 결합된 당은 염에 의해서 막을 씻어 회수하였다. N-Acetylchitohexaose-형광기 결합체와 형광기가 결합되어 있지 않은 N-acetylchitohexaose를 Serratia marcescense, Streptomyces griseus, 식용의 파(Allium fistulosum L.)로부터 얻어진 세 종류의 chitinase와 반응시켰다. 형광기 결합체와의 반응물을 분석용 전기영동에 걸었을 때 자외선 장파장에서 띠가 인식될 수 있었다. 이와 같은 전기영동 방법에 의한 반응생성물의 분석을 통해서 서로 다른 종류의 chitinase의 작용에 관한 특징을 알 수 있었다.
Gradient polyacrylamide gel electrophoresis was used to analyze the products formed by chitinases acting on N-acetylchitohexaose-fluorescent conjugate. N-Acetylchitooligosaccharides were conjugated to 7-amino-1,3-naphthalene disulfonic acid by reductive amination. Each oligosaccharide-fluorescent conjugate was purified by preparative gradient polyacrylamide gel electrophoresis, semi-dry electrotransfer to a positively-charged nylon membrane and recovered by washing the membrane with salt solution. N-Acetylchitohexaose-fluorescent conjugate and chitohexaose were exhaustively treated with three kinds of chitinases from Serratia marcescens, Streptomyces griseus, and green onin (Allium fistulosum L.). The bands were visualized under long wavelength of UV light. Analysis of reaction products provided the information on the action of chitinase action from different sources.
