표고버섯, Lentinus edodes (Berk.) Sing 중의 가지달린 아미노산 aminotransferase(BCAT)의 enzyme I과 II를 황산암모늄 분별침전, DEAE-cellulose column 크로마토그래피 및 Sephadex G-150 겔 여과하여 각각 분리정제한 후, enzyme I과 II의 동질효소 여부를 구명하기 위하여 enzyme II의 분자량, N-말단, 아미노산 조성, 최적 pH, 최적 온도, $K_m$값, 유기물 및 금속이온 효과 등을 실험하였다. 이 효소의 겉보기 분자량은 72,000 dalton 이었고, N-말단 아미노산은 L-leucine이었으며, 음성잔기를 가진 아미노산이 양성잔기를 가진 것보다 3.67% 더 많이 존재하였다. 최적 pH 및 최적 온도는 각각 8.2, $38^{circ}C$ 였으며, $20^{circ}C$이하에서 30분 동안 안정하였다. 이 효소는 기질인 가지달린 아미노산 중 L-leucine에 대해서만 활성을 보였으며, hydroxylamine, N-ethylmaleimide 및 p-chloromercuribenzoate 등의 유기물과 $Cu^{2+}$, $Hg^{2+}$ 및 $Fe^{3+}$ 등의 금속이온에 의하여 활성이 억제 되었다. 아미노기 공여체인 L-leucine과 아미노기 수용체인 $alpha$-ketoglutarate에 대하여 활성도 측정시의 조건하에서 측정된 $K_m$값은 각각 3.39 및 0.28 mM이었다. 이로써 enzyme II와 I은 분자량, N-말단 아미노산, 아미노산 조성, 최적 pH 및 최적 온도 그리고 $K_m$값 등은 서로 다르지만, L-leucine 기질에 대하여 같은 기질 특이성을 보이는 효소였다.
Enzyme I and II of branched chain amino acid aminotransferase (BCAT) in Lentinus edodes (Berk.) Sing was purified by ammonium sulfate fractionation, DEAF-cellulose column chromatography and sephadex G-150 gel filtration. We have been studied molecular weight, N-terminal amino acid, composition of amino acids, optimum pH, optimum temperature, $K_m$ value and effect of organic compounds and metal ions about enzyme II, to identify isozyme patterns between enzyme I and II. Apparent molecular weight of enzyme II was estimated 72,000 dalton, N-terminal amino acid was determined glycine. The enzyme II was existed as negatively charged amino acids rather than positively charged ones by more than 3.67%. Optimum pH and temperature were found to be 8.2 and $38^{circ}C$, respectively. It was stable for 30 min under $20^{circ}C$. This enzyme showed the activity toward L-leucine, as a substrate. It was inhibited by both organic compounds of hydroxylamine, N-ethylmaleimide and p-chlromercuribenzoate and metal ions of $Cu^{2+}$, $Hg^{2+}$ and $Fe^{2+}$. The $K_m$ values were determined to be 3.39 mM for L-leucine as a amino group donor, 0.28 mM for $alpha$-ketoglutarate as a amino group acceptor. Although their molecular weight, N-terminal amino acid, composition of amino acids, optimum pH and temperature and $K_m$ values had been different between enzyme I and II, but they showed same substrate specificity for L-leucine as a substrate.
