- 소의 뇌로부터 GTP 결합단백질의 분리
- ㆍ 저자명
- 김정희,Kim. Jung-Hye
- ㆍ 간행물명
- 영남의대 학술지
- ㆍ 권/호정보
- 1993년|10권 2호|pp.360-368 (9 pages)
- ㆍ 발행정보
- 영남의대학술지편집위원회
- ㆍ 파일정보
- 정기간행물| PDF텍스트
- ㆍ 주제분야
- 기타
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세포막 정보전달 경로에서 수용체에 전달된 정보를 세포내로 전달하는데 조절 단백질로 알려진 GTP 결합단백질을 소외 뇌조직으로부터 정제하고 그 분자량등을 관찰하였다. 분쇄한 소의 뇌조직으로부터 세포막을 분리 해내고 1% cholate를 이용하여 세포막 단백질을 얻었으며 DEAE-Sephacel column chromatography를 시행하였다. 여기서 얻은 GTP 결합단백질은 다시 Ultrogel AcA 34 column chromatography, heptylamine-Sepharose column chromatography 순으로 실시하여 $GTP{gamma}S$와 결합하는 단백질 분획을 모았고 활성도와 일치하는 분획을 얻었다. 전기영동으로 관찰한 결과 $Go{alpha}$가 분자량 39,000 dalton. $G{eta}$가 36,000 dalton인 band를 확인하였고 나머지 다른 단백질도 함께 관찰되어 heptylamine-Sepharose 분획을 다시 DEAE-Sephacel column에 적용하여 순수한 band를 구하였다. GTP 결합단백질의 활성화는 GTP가 결합될 때 ${alpha}$부분과 결합하고 ${eta}{gamma}$는 떨어져 나간다. 그러므로 heptylamine-Sepharose column분획의 활성도에서 $Go{alpha}$의 band 분획과 곡선의 활성도가 일치하고 ${eta}$는 곡선이 하향하는 분획에서 전기영동상에 관찰되었다.
GTP binding protein (G-protein) associated with membrane and involved in signal transduction was isolated from bovine brain, and molecular weight of G protein was observed. As the results, cell membranes were homogenized from bovine brain tissues and proteins of membrane were gained using 1% cholate, and progressed the chromatography. The purification process was performed by step, DEAE-Sephacel, Ulttrogel AcA 34 and heptylamine-Sepharose column chromatography. The chromatographic fractions were confirmed by GTP binding assay and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. Molecular weight of $Go{alpha}$ was revealed 39,000 dalton and $G{eta}$ 36,000 dalton. One more step of heptylamine-Sepharose was enforced to purify the GTP binding protein. Finally I gained the GTP binding protein isolated subtype of $Go{alpha}$ and $G{eta}$.