소의 뇌(bovine brain)로부터 ${gamma}-Aminobutyraldehyde$ dehydrogenase를 순수하게 정제하였다. 아미노산의 조성과 C.D. spectrum을 통해 효소의 이차구조를 분석한 결과, 소의 뇌 ${gamma}-Aminobutyraldehyde$ dehydrogenase는 7%의 ${alpha}-helix$, 64%의 ${eta}-strand$로 구성되어 있었으며, 아미노산의 조성에 있어서는 glicine과 proline이 많이 포함되어 있었다. 또한 ${gamma}-Aminobutyraldehyde$ dehydrogenase의 활성부위에 관여하는 아미노산을 조사하기 위하여, 효소를 chemical modification reagents인 NEM, DTNB, PLP, DEP 및 PMSF와 반응시킨 후 효소활성의 감소를 관찰하였다. 정제한 효소에 NEM, DTNB, DEP, PLP를 처리하였을 경우, 효소활성이 매우 심하게 감소하였고, PMSF에 의해서는 약간 효소활성이 감소되었다. NEM, DTNB, DEP, PLP에 의한 효소활성의 감소는 기절에 의해 90% 이상 보호되었다. Chemical modification 결과와 C.D. spectra 분석결과, ${gamma}-Aminobutyraldehyde$ dehydrogenase의 활성부위에는 cystein과 lysine 그리고 histidine이 관여할 것으로 생각되며, cystein과 lysine에 대한 반응상수를 계산한 결과, 하나의 cystein기와 하나의 lysine기가 효소활성에 작용함을 알 수 있었다.
${gamma}-Aminobutyraldehyde$ dehydrogenase was purified to homogeneity from the bovine brain. An analysis of amino acid composition and circular dichroic spectra suggests that the purified enzyme consists of 7% of ${alpha}-helix$ and 64% of the ${eta}-strand$, and glycine and proline residues are rich. We examined the chemical modification of purified enzyme by NEM, DTNB, PLP, DEP, and PMSF. ${gamma}-Aminobutyraldehyde$ dehydrogenase was severely inactivated by NEM, DTNB, DEP, and PLP, and less effectively by PMSF. But the substrate provided almost complete protection against inactivation by NEM, PLP and DEP. Cumulative results suggest that cysteine, lysine and histidine residues seem to be involved in the enzyme activity, and CD spectra also support such results. Kinetic data show that one cysteine and one lysine are associated with or involved. in enzyme activity.
