해녀콩(Canavalia lineata) 자엽에서 canavalin 분해활성을 갖는 endopeptidase를 분리하여 합성기절에 대한 특이성과 protease 억제제의 효과를 조사하였다. Canavalin 분해효소는 DEAE-Sephacel 컬럼에 붙지 않는 분획을 Sephacryl S-300 컬럼을 통과시켜 분리하였으며, 분자량이 각각 200 kD(protease I)와 27 kD(protease II)인 2종으로 밝혀졌다. 이들 protease I과 II는 공통적으로 49kD의 canavalin 단위체에 작용하여 25kD과 24kD의 폴리펩티드를 생성하였으며, EDTA와 phenanthroline에 의하여 활성이 크게 억제되어 metalloproteinase 로 판단되었다. 그러나, protease I은 Cbz-ala-ONp, Cbz-leu-ONp 등의 지방족 사슬을 갖는 기질을, protease II는 Cbz-asn-ONp, Cbz-gln-ONp 등의 아미드기를 가진 기질을 잘 분해하였다.
Two canavalin-hydrolyzing proteases (proteases I and II) from the cotyledons of Canavalia lineata were isolated and characterized. These proteases were isolated by Sephacryl S-300 column chromatography from fractions excluded from DEAE-Sephacel column and elucidated to hydrolyze the 49 kD canavalin subunit into two fragments of 25 kD and 24 kD. The approximate molecular weights of proteases I and II were estimated as 200 kD and 27 kD, respectively. The proteases I and II were inhibited by EDTA and phenanthroline, and so proteases I and II seemed to be metalloproteinases. The protease I readily hydrolyzed synthetic ester between ${ ho}-nitrophenol$ and amino acid having aliphatic side chain, and the protease II readily hydrolyzed esters with amino acids having amide group.
