- 대장균에서 발현되는 Cellulomonas fimi $eta$-glucosidase의 효소학적 특징
- ㆍ 저자명
- 김하근,Kim. Ha-Kun
- ㆍ 간행물명
- 自然 科學 論文集 : 배재대학 첨단과학연구소
- ㆍ 권/호정보
- 1996년|8권 2호|pp.57-61 (5 pages)
- ㆍ 발행정보
- 배재대학교 자연과학연구소
- ㆍ 파일정보
- 정기간행물| PDF텍스트
- ㆍ 주제분야
- 기타
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Cellulomonas fimi에서 유래한 $eta$-glucosidase 유전자를 갖고 있는 대장균으로부터 $eta$-glucosidase 효소를 정제하였다. 전기 영동과 크로마토그라피 실험을 수행함으로써 정제된 효소의 분자량은 56,000 달톤이며 단일 폴리펩티드로 구성되어 있음을 알 수 있었다. 정제된 $eta$-glucosidase 효소는 당이 $eta$-결합을 하고 있는 cellobiose, PNPG, PNPC 등의 기질에 대하여 작용하여 분해시킬 수 있었으나, $alpha$-결합을 갖고있는 maltose는 분해할 수 없었으므로, $eta$-결합에 대한 기질 특이성을 갖고 있음을 알았다. 철, 수은, 구리 등의 중금속 이온들에 의해 효소 활성이 저해되었고 DTT에 의해 효소의 활성이 활성화됨을 보임으로써 $eta$-glucosidase 효소의 활성화 부위는 -SH 기가 중요하게 작용하고 있음을 시사하였다.
The $eta$-glucosidase enzyme was purified from E. coli carrying Cellulomonas fimi $eta$-glucosidase gene. SDS-PAGE and analytical gel filtration revealed that molecular weight of this enzyme was 56,000 dalton and consisted of a single polypeptide.Inhibition caused by heavy metals and activation by dithiothreitol suggest the existence of essential thiol group in the enzyme. The enzyme was not active on maltose (glucose $alpha$-1,4-glucose) which has a $alpha$-linkage, whereas it was active on lactose (glucose $eta$-1,4-glucose), PNPG (p-nitrophenyl $eta$-D-glucopyranoside) and PNPC (p-nitrophenyl $eta$-D-cellobioside), although its reaction rates were different.