자연계로부터 locust bean gum이 들어 있는 선택배지에서 투명환을 형성하는 mannan 분해능을 갖는 미생물을 스크링 하였고 이를 Aeromonas sp. 로 동정하였다. Aero monas sp. 로부터 염색체 DNA를 분리하여 EcoRI으로 절단하여 대장균에 형질전환한 후 대장균 콜로니 주위에서 locust bean gum을 분해하여 투명환을 형성하는 대장균을 찾아냈다. 형질전환된 대장균으로부터 플라스미드를 분리하여 동일한 제한효소를 처리하여 확인한 결과 10 kd의 Aeromonas sp. 염섹체 DNA에 $eta$-mannanase 유전자 존재하였다. 대장균에서 발현된 $eta$-mannanase 의최적 반응 pH와 최적 반응온도는 각각 6.0과 $50^{circ}C$로서 모균인 Aeromonas sp. 와 동일하였다.
A bacteria strain producing extracellular $eta$-mannanase was isolated from soil and was identified as Aeromonas sp. A genomic DNA library constructed from Aeromonas, sp that secrets a $eta$-mannanase was screened for mannan hydrolytic acticity. Recombinant $eta$-mannanase activity was detercted on the basis of the clear zones around Escherichia coli colonies grown on a LB medium supplemented locust bean gum, EcoRI restriction analysis of plasmid prepared from recombinant E. coli which showed a $eta$-mannanase activity revealed 10 kb DNA insert, The optimum pH and temperature for the activity of reconmbinant $eta$-mannanase were 6.0 and $50^{circ}C$ respectively and were identical to those of the native enzyme.
