축산폐수가 방류되는 단위동물 밀집사육장 인근의 하천수로부터 phytase를 생산하는 세균들 중 활성이 가장 우수한 균주를 분리하여, Pseudomonas fragi Y9451로 동정, 명명하였다. 탄소원으로 fructose를 첨가할 경우에 phytase의 생산능이 가장 우수하였고, 배지에 7% 첨가할 경우에 72시간 배양 후 효소활성이 1,078 mU/ml로 최대의 phytase 생산능을 보였다. 또한, 질소원으로는 nutrient broth(NB)가 적합하였으며, NB를 3%의 농도로 첨가할 경우에 96시간 배양 후 효소활성이 1,425 mU/ml까지 향상되었다. 인산원인 $KH_2PO_4$, phytate는 첨가 농도가 높을수록 phytase 생산은 억제되었으며, 무기염으로 $MgSO_4$와 $CaCl_2$를 첨가하는 경우는 첨가농도와 상관없이 phytase의 생산을 현저히 억제하였다. 산업생산을 목적으로 하는 scale-up에 있어서의 통기교반 효과는 phytase의 생산량에 큰 영향을 미치는 것으로 나타났다.
A bacterial strain producing a high level of an extracellular phytase was isolated from livestock waste water, identified as a strain of Pseudomonas fragi and designated as Pseudomonas fragi Y9451. Under the phytase production medium, the activity of phytase reached the highest level after 120 hours of incubation. On the effect of carbon sources on the phytase production, the most favorable carbon source for phytase production was fructose. As for the effect of nitrogen sources, high levels of phytase activity were detected in the medium containing nutrient broth as the nitrogen source. Free $PO_4^{3-}$ inhibited phytase production with increasing concentration of $KE_2PO_4$ and phytate in the media. The addition of $CaCl_2$ and $MgSO_4$ also resulted in the inhibition of phytase production. To investigate the effect of aeration on the phytase production, different volumes of culture broth in Erlenmeyer flasks were incubated in rotary shaker at the speed of 200 rpm. As a result, a high level of phytase activity was detected at small volume of culture broth as compared to larger volume because of its more aerobic condition.
