가정에서 제조된 된장으로부터 -galactosidase의 생산균으로 분리된 YB-42는 형태적 특성, 생화학적 성질 및 16S rRNA의 염기서열에 근거하여 Bacillus licheniformis로 동정되었다. B. lichentyormiE YB-42의 -galactosidase 활성은 균체내ㆍ외에서 모두 관찰되었다. 배양상등액으로부터 DEAE-Sepharose와 Q-Sepharose 컬럼 크로마토그래피를 통해 부분 정제한 -galactosidase을 사용하여 para-nitrophenyl--D-galactopyranoside(pNP-Gal)의 가수분해 반응특성을 조사한 결과 와 pH 6.5에 서 최대 활성을 보였다. Melibiose, raffinose와 stachyose는 부분 정제효소액에 의해 완전히 가수분해 되었으며, 분해산물로 galactose가 생성된 것으로 보아 -1,6 결합이 분해된다는 것이 확인되었다. 한편 pNP-Gal과 melibiose의 가수분해 활성은 galactose에 의해 가장 크게 저해되었으며, galactose보다는 낮지만 pNP-Gal의 가수분해 활성이 mannose와 glucose에 의해서도 저해되는 것으로 나타났다.
A bacterium producing the $alpha$-galactosidase was isolated from Korean soybean paste. The isolate YB-42 has been identified as Bacillus licheniformis on the basis on its 16S rRNA sequence, morphology and biochemical properties. The $alpha$-galactosidase activity was detected in both the culture supernatant and the cell extract of B. licheniformis YB-42. The partially purified extracellular $alpha$-galactosidase was obtained from the culture supernatant by DEAE-Sepharose column and Q-Sepharose column chromatography. The enzyme showed the maximum activity for hydrolysis of para-nitrophenyl-$alpha$-D-galactopyranoside (pNP-$alpha$Gal) at pH 6.5 and $45^{circ}C$. It was able to hydrolyze oligomeric substrates such as melibiose, raffmose and stachyose to liberate galactose residue, indicating that the a-galactosidase of B. licheniformis YB-42 hydrolyzed $alpha$-1,6 linkage. The hydrolyzing activity of $alpha$-galactosidase for both pNP-$alpha$Gal and melibiose was dramatically decreased by galactose. Both glucose and mannose inhibited the activity for pNP-$alpha$Gal less than galactose.
