Thiol peroxidase인 E.coli AhpC의 아미노산 서열을 database를 이용해 분석하여, TPx와 상동성이 있는 새로운 형태의 Thiol peroxidase를 찾아내었다. 그 중 병원성을 갖는 박테리아인 Haemophilus Influenzae에서 존재하는 TPx와 유사하고, GRX와 함께 fusion 되어있는 새로운 형태의 단백질의 유전자를 클로닝하여 E.coli에서 과발현시켜 분리정제 하였다. 정제된 TPx-GRX는 환원제로 thiol 성분을 갖는 MCO system(Fe, DTT, Oxygen)에 의하여 Glutamine Synthetase(GS)의 불활성화를 방어하는 티올 특이적 향산화활성을 갖고, peroxides를 제거하는 peroxidase 활성을 갖는 것을 밝혔다. 이 결과들로부터 TPx-GRX는 새로운 형태의 Thiol perosidase임을 알 수 있었다. 더 나아가서 이 결과들은 TPx-GRX가 병원성 박테리아에서 oxidative stress를 막는 생리적으로 중요한 역할을 할 것이라는 것을 시사한다.
We found new type of thiol peroxidase, fused with GRX.(TPx-GRX) The TPx-GRX exists in pathogenic bacteria including -. This protein was homogeneously purified from the E.coli recombinant overexpressing TPx-GRX. In the presence of a thiol-containing electron donor such as DTT, the purified TPx-GRX has potent the antioxidant to prevent the inactivation of GS by the MCO system, which is comprised of DTT, $Fe^{3+}$, and $O^2$. The antioxidant activity is much higher that other thiol peroxidase. The investigate the peroxidase activity of TPx-GRX, we directly measured the peroxidase activity of TPx-GRX toward peroxides in terms of the removal of peroxides in the presence of GSH. This result demonstrates that the peroxidase activity of TPx-GRX. These taken together results suggest that TPx-GRX is a new member of thiol peroxidase. These observations also suggest that in the pathogenic bacteria, TPx-GRX plays an important antioxidative role as a multiple array defence mechanism against oxidative stress.
