본 연구자들은 백출의 메탄올 추출물로부터 분리, 정제한 selina-4(14), 7(11)-dien-8-one (Selina)이 B16 멜라노마 세포에 대하여 매우 강력한 미백효과가 있음을 밝혀내었다. 본 연구에서는 Selina의 non-tumorigenic melanocyte cell line인 Melan-a 세포에 대한 작용 메카니즘에 대한 보고를 하고자 한다. 덧붙여 Selina를 함유하고 있는 제품의 임상효과도 연구하였다. Selina는 $10 {mu}g/mL$의 농도에서 세포독성을 보이지 않으면서 Melan-a 세포의 멜라닌 합성을 $50\%$ 저해하였다. 또한 $10 {mu}g/mL$의 Selina의 처리에 의하여 타이로시네이즈의 활성이 $60\%$ 감소시키지만 타이로시네이즈에 대한 직접적인 저해활성은 없는 것으로 밝혀졌다. 이러한 Selina의 작용 기작을 밝히기 위하여 연구자들은 타이로시네이즈, TRP-1, TRP-2의 3가지 유전자의 mRNA 수준과 단백질의 발현량을 RT-PCR과 western blotting을 이용하여 연구하였다. 그 결과 $10 {mu}g/mL$의 Selina 처리에 의하여 타이로시네이즈의 mRNA와 단백질 양은 현저히 감소하였지만 TRP-1과 TRP-2의 mRNA 및 단백질 양에는 변화가 없었다. 이러한 결과는 Selina가 그 미백효과를 주로 타이로시네이즈의 발현조절에 의하여 나타낸다는 것을 알 수 있다. $0.2\%$의 Selina를 함유하는 화장품 제형을 이용, 7주간 20명의 피시험자를 대상으로 한 임상시험에서도 어떠한 부작용도 없이 통계적으로 유의한(p<0.05) 수준의 미백효과를 볼 수 있었다. 이상의 결과를 종합해 볼 때 Selina는 깨끗하고 밝은 피부를 위한 유용하면서도 안전한 신규 미백 원료임을 알 수 있다.
We had previously reported that Selina (selina-4(14), 7(11)-dien-8-one) was isolated from methanol extract of Afractylodes rhizome and has strong whitening activity in B16 melanoma cells. In this report, we demonstrated its action mechanism in melan-a cells, non-tumorigenic melanocytes. We also investigated the clinical efficacy of cosmetic preparation containing Selina. Selina reduced the melanin synthesis of Melan-a cells by $50\%$ at a concentration of $10 {mu}g/mL$ without any apparent cytotoxicity. We also found that the treatment of cells with Selina decreased tyrosinase activity by $60\%$ at a concentration of $10 {mu}g/mL$ but Selina was not a direct inhibitor of tyrosinase activities. To elucidate the action mechanism of Selina, we investigated the changes in mRNA and protein level of tyrosinase, TRP-1 and TRP-2 using RT-PCR and western blotting, respectively. As a result, the mRNA and protein level of tyrosinase were markedly reduced at $10 {mu}g/mL$ of Selina without any effect on TRP-1 and TRP-2. These results suggest that Selina exerts its whitening effect mainly through regulating expression of tyrosinase. A 7 week-clinical trial using formulation containing $0.2\%$ selina-4(14), 7(11)-dien-8-one with 20 volunteers resulted in statistically significant whitening effect (p < 0.05), without any adverse effect. Based on these results, Selina (selina-4(14), 7(11)-dien-8-one) can be s useful and safe ingredient for the cleanness and brightness of skin.
