본 연구는 한우 난포란이 체외성숙된 환경의 변화를 단백질 측면으로부터 검토하기 위하여 체외성숙 배지와 세포질내 단백질 변화와 종류를 검토하였다. 그 결과 배지 내의 단백질 발현량은 배양 4.5시간째까지 감소하였고, 배양 13.5시간째까지는 변화가 없었다. 그러나 배양 $13.5~18$시간 사이에 증가한 후 배양 18시간 이후에 다시 감소하는 경향이었다. 세포질내의 단백질 발현량은 배양 4.5시간째까지 증가하였고 배양 9시간째까지 급격히 감소하였다. 배양 9시간째부터 18시간째 까지는 단백질 발현량이 유사한 경향이었으나 배양 18시간째부터 24시간째까지 다시 증가하였다. 한편 체외성숙한 배지와 세포질을 2차원 전기영동하여 각각 298개 및 35개의 단백질 spot을 확인하였고, 그 중 배지에서는 28개, 세포질에서는 5개의 spot이 유의적인 변화를 확인하였다. 이들 spot 대한MALDI-TOP분석으로 배지와 세포질에서 각각 8개 및 1개의 단백질을 동정하였다. 그 종류는 aldose reductase, alpha enolase, apolipoprotein A-1 precursor, 43M1a collectin precursor, heat shock 27kDa protein, plasminogen activator inhibitor-1 precursor, thrombospondin 1 transitional endoplasmic reticulum ATPase 및 $eta$-tubulin이었다.
This study was designed to investigate the changes of quantity and quality of proteins in medium and cytoplasm during in vitro maturation of bovine oocytes. The total quantity of proteins in medium decreased from 0 to 4.5 hr, but increased from 13.5 to 18 hr after the onset of in vitro maturation. The total quantity of protein in cytoplasm increased from 0 to 4.5 hr, decreased from 4.5 to 9 hr, and increased after 18 hr after the onset of in vitro maturation. A total of 298 protein spots was detected on a gel of 2D SDS-PAGE form maturation medium. Among 28 protein spots expressed significant differences in their quantity, 8 proteins were identified by peptide mass fingerprinting (aldose reductase, alpha enolase, apolipoprotein A-1 precursor, 43kDa collectin precursor, heat shock 27kDa protein, plasminogen activator inhibitor-1 precursor, thrombospondin 1, transitional endoplasmic reticulum ATPase). Among total of 35 protein spots detected on gel of 2D SDS-PACE from oorytes cytoplasm, $eta$-tubulin was identified by peptide mass fingerprinting.
