${eta}-catenin$과 결합하는 ErbB2의 부위를 조사하기 위하여 proteasome에 의하여 분해되지 않는 ${eta}-catenin$과 다양한 ErbB2 construct를 COS7 세포에 transfection한 후 ErbB2 단백질을 그것의 항체로 가라앉혔다. 이 때 공침한 ${eta}-catenin$을 Western blot으로 분석하였다. C 말단에서부터 잘려진 ErbB2 단백질 중에 kinase 영역을 가지고 있는 것들만 ${eta}-catenin$과 공침하였다. kinase 영역의 필요성을 확인하기 위하여 kinase 영역이 내부에서 제거된 ErbB2 construct를 ${eta}-catenin$과 transfection 한 후 동일한 실험을 실시하였다. 이 실험에서 ${eta}-catenin$는 kinase 영역이 내부적으로 제거된 ErbB2 단백질과 공침하지 않았다. 이 결과는 ${eta}-catenin$과 결합하는 ErbB2의 위치는 kinase 영역내에 있음을 제시한다.
To investigate the region of ErbB2 for the $ErbB2-{eta}-catenin$ interaction, a proteasome $resistant-{eta}-catenin$ and various ErbB2 constructs were transfected in COS7 cells. ErbB2 proteins were immunoprecipitated, and coimmunoprecipitated ${eta}-catenin$ was examined by Western blotting. ${eta}-catenin$ coimmunoprecipitated with full length ErbB2. Of the truncated ErbB2 proteins DT (1-1123), DHC (1-1031) and DK (1-750), the ErbB2 constructs containing the kinase domain, DT and DHC, precipitated together with ${eta}-catenin$ but DK containing no kinase domain did not. To further test the requirement of the kinase domain for ${eta}-catenin-ErbB2$ interaction, the presence of ${eta}-catenin$ in the immunocomplex was examined following transfection with an ErbB2 mutant (${ riangle}750-971$) whose kinase domain is internally deleted and subsequent immunoprecipitation of the ErbB2 mutant. ${eta}-catenin$ was not detected in the immunocomplex. These results suggest that the ErbB2 kinase domain comprises a potential site for ${eta}-catenin$ binding to the receptor tyrosine kinase.
