유자씨의 limonin 및 nomilin에 대한 최적 추출조건을 선정하기 위하여 추출온도($30-70^{circ}C$; $X_1$), 추출시간(1-5 hr; $X_2$) 및 교반속도(200-600 rpm; $X_3$)를 독립변수로 중심합성계획법에 따라 실험설계한 각각의 추출조건에서 limonin 및 nomilin 함량을 측정하였다. Limonin 및 nomilin 추출 조건의 최적화를 위하여 추출용매는 ethanol, 추출용매의 양은 20배 그리고 추출용매 농도는 60%로 선정하였다. Limonin 및 nomilin 추출에 미치는 추출조건의 영향은 추출온도가 가장 컸으며(p<0.01) 그 다음으로는 추출시간으로 나타났다. 반응표면분석결과 최적 추출조건은 limonin에서는 추출온도, 추출시간 및 교반속도가 각각 $49.7^{circ}C$, 3.3 hr 및 400.6 rpm으로 나타났으며, 이때의 추출량은 353.9 mg/100 g이었다. Nomilin은 각각 $50.3^{circ}C$, 3.5 hr 및 399.9 rpm이었으며, 추출량은 214.5 mg/100 g이었다. 동일조건에서의 실험값은 limonin 및 nomilin이 가각 338.8 및 219.5 mg/100 g으로 예측값과 실험값이 유사하여 최적화할 수 있었다.
In this study, response surface methodology was employed in order to optimize the limonin and nomilin extraction conditions from citron seed. The independent variables were extraction temperature, extraction time, and shaking velocity. The yield of limonin and nomilin increased with increased extraction temperature and time. The extraction effects on the limonin and nomilin were higher at extraction temperature (p<0.01). The predicted extraction conditions were validated through actual experiments. The predicted conditions were as follows: $49.7^{circ}C$ of extraction temperature, 3.3 hr of extraction time, and 400.6 rpm of shaking velocity for the maximum limonin contents (353.9 mg/100 g) and $50.3^{circ}C$, 3.5 hr, and 399.9 rpm for the maximum nomilin contents (214.5 mg/100 g). The experimental values of limonin and nomilin contents at the predicted conditions were 338.8 and 219.5 mg/100 g, respectively. The predicted values at the optimized conditions were acceptable when compared to the experimental values.
