항생제 대체물질로서 양돈용 생균제를 개발하기 위하여, 돼지의 소장 및 대장으로부터 500균주의 미생물을 분리하였으며, 항균물질인 박테리오신을 생산하는 5균주를 최종적으로 선발하였다. 선발균주들은 모두 Lactobacillus 속으로 동정되었으며, 생균제를 개발할 목적으로 상기 균주 중 Lactobacillus sp. HN 235 균주에 대한 균주 및 박테리오신 특성을 조사하였다. HN 235 균주의 성장시간에 따른 생균수 및 항균활성을 측정한 결과, 18시간째 최대 $3.5{ imes}10^9;cfu/mL$까지 성장하였으며, 항균활성은 유도기에 나타나기 시작하여 정체기에 6,400 AU/mL로 최고의 활성을 보이다가 급격하게 활성을 상실하였다. HN 235 균주가 생산하는 박테리오신은 병원성 균주로 알려진 L. monocytogenes와 Cl. perfringens에 대하여 강한 항균능력을 나타냈으며, 상기 박테리오신의 항균활성은 단백질 분해효소 처리시 활성을 상실하였다. 또한 $95^{circ}C$에서도 활성을 유지하였으며, pH 2~10 범위 및 유기용매에 대해서도 비교적 안정한 항균활성을 나타내었다. SDS-PAGE를 실시하여 분자량을 측정한 결과, 대략 5 kDa으로 확인되었다.
In order to develop probiotics which may be a viable alternative of antibiotic use in pig industry, five bacterial strains (Lactobacillus sp. HN 52, 92, 98, 235 and AP 116) possessing antimicrobial properties were selected from 500 strains isolates of pig intestines. The bacteriocin produced by Lactobacillus sp. HN 235 displayed a relative broad spectrum of inhibitory activity against all Enterococcus strains, Pseudomonas aeruginosa, Listeria monocytogenes and Clostridium perfringens using the spot-on-lawn method. The production of antimicrobial substance started in the middle of the exponential growth phase, reached maximum levels (6,400 AU/mL) in the stationary phase, and then declined. Bacteriocin activity remained unchanged after 30 min of heat treatment at $95^{circ}C$ and stable from pH 2.0 to 10 for 1 h, or exposure to organic solvents; however, it diminished after treatment with proteolytic enzymes. The molecular weight of the bacteriocin was about 5 kDa according to a tricine SDS-PAGE analysis.
