본 연구에서는 새로운 제형 클로렐라제품의 정확한 총 엽록소 정량시험법을 마련하기 위해 새로운 제형 중 Syrup과 Candy 두 가지 제형의 제품을 마련하여 현행 공전방법을 적용한 함량 비교시험을 하였고 보다 정확한 결과 값을 나타낸 제1법인 pyridine 추출법의 전 처리방법을 개선하기 위하여 alkari성 pyridine으로 시료에서 엽록소를 추출하기 위하여 30분간 방치하고, 15분간 가온 할 때 초음파 처리를 병행하는 방법을 개발하여 그 결과 값의 정확성, 정밀성을 검토하였고 또 matrix sparking에 의한 정밀성과 재현성을 검토하였다. 그 결과 액상제품의 경우 pyridin 추출법과 acetone 추출법의 결과 값 CV는 18.82와 40.00, 이론치에 대한 결과 값이 106.3%와 78.1%로 상당한 차이를 보였다. Pyridin 추출법과 pyridin 추출법에 초음파 전 처리를 추가한 결과는 $27.2{pm}5.12;mg$/100 g와 $25.0{pm}2.84;mg$/100 g로 표준편차가 상당히 줄어들었고 CV도 18.82에서 11.36으로 상당히 줄어들었다. 이론치 대비율도 106.3%와 97.7%로 pyridin-초음파 추출방법이 보다 이론치에 근접한 것으로 나타났으며 회수율 측정을 하기 위하여 pyridin-초음파 추출법에 matrix spiking 한 결과도 표준편차, CV값과 이론치 대비율이 모두 향상된 결과를 나타내었다. 고형제품의 경우도 pyridin 추출법과 acetone 추출법의 결과 값 CV는 7.05와 30.00, 이론치에 대한 결과 값이 62.7%와 40%로 상당한 차이를 보였다. Pyridin 추출법과 pyridin 추출법에 초음파 전처리를 추가한 결과는 $62.7{pm}4.42;mg$/100 g와 $99.4{pm}4.06;mg$/100 g로 표준편차가 상당히 줄어들었고 CV값도 7.05에서 4.08로 상당히 줄어들었다. 이론치 대비율도 62.7%에서 99.4%로 pyridin-초음파 추출법이 명확하게 이론치에 근접한 것으로 나타났으며 회수율 측정을 하기 위하여 pyridin-초음파 추출법에 matrix spiking 한 결과도 표준편차, CV값과 이론치 대비율 모두 향상된 결괴를 나타내었다.
A new and improved analytical method involving alkaline pyridine extraction was proposed to quantity chlorophyll contents in syrup and candy type chlorella products. The performance of analytical method was compared with the conventional Korea food standard method which involves acetone extraction. The application of sonication chlorophyll extraction form alkaline pyridine sample was also explored. The analytical procedure was validated by evaluating accuracy, precision and reproducibility. For liquid samples, the pyridine extraction method showed higher accuracy and precision compared to acetone extraction method. The CV values of pyridine extract method and the acetone extraction method were 18.82 and 40.0, and the accuracy to theoretical values were 106.3% and 78.1%, respectively. When sonication extraction method was applied to the pyridine extraction, the precision was improved as indicated by reduced CV values from 18.82 to 11.36. The improved performance of pyridine-sonication extraction was also validated by recovery test of chlorophyll that was previously spiked into the sample matrix. For solid matrix, the pyridine extraction method showed better performance in analysis of chlorophyll in solid food matrix (CV = 7.05) compared to conventional acetone extraction method (CV = 30.0). However, the accuracy to theoretical values of pyridine and acetone extraction methods only showed only 62.7% an 40%, respectively. The relatively low accuracy of pyridine extraction method (62.7%) was improved to 99.4% by applying additional sonication extraction method. The improved performance of applying additional sonication extraction was validated by standard deviation, CV values and accuracy to theoretical values.
