망막조직공학을 위한 생체 재료는 기계적 안정성, 생체적합성, 낮은 분해속도 등을 포함하여 in vivo에서 잠재적인 유용성을 위한 몇 가지 중요한 특징이 입증되어야 한다. 실크 필름 생체재료는 이러한 기능적인 요구에 맞게 디자인되었다. 0, 10, 20, 40, 및 80 wt%의 실크가 함유된 천연합성물질과 하이브리드화된 silk/PLGA 필름을 용매 증발법으로 제조하였다. 1, 2, 및 3일 후에 부착된 세포 수를 확인하기 위해 MTT 분석을 하였고 SEM을 통해 필름에 부착된 세포 모폴로지를 확인하였다. 또한, mRNA 발현정도를 알아보기 위해 retinal pigment epithelitun(RPE) 세포의 프라이머인 RPE65를 사용하여 RT-PCR을 실시하였고 RPE 세포의 특정 단백질인 cytokeratin의 발현을 확인하고 세포의 증식을 비교하기 위해 면역화학염색을 실시하였다. 본 실험을 통해 실크/PLGA 필름에서 20~40 wt% 실크를 함유한 경우에 RPE 세포의 부착과 증식에 가장 좋은 영향을 미치는 것을 확인하였다.
Biomaterials for retinal tissue engineering must demonstrate several critical features for potential utility, including mechanical integrity, biocompatibility, and slow biodegradation. Silk film biomaterials were designed and characterized to meet these functional requirements. We prepared natural/synthetic hybrid silk/PLGA films using 0, 10, 20, 40, and 80 wt% of silk by a solvent evaporation method. MIT assay was used to confirm the number of cells attached on film at 1, 2, and 3 days, respectively. The morphology of cellular adhesion on films was also confirmed by scanning electron microscope (SEM). RT-PCR was conducted to confrrm mRNA expression of retinal pigment epithelitun (RPE) using RPE65 as a RPEs marker and the expression of cytokeratin were determined by immunofluorescence staining. We confirmed that the silk/PLGA film of 20~40 wt% silk was superior for the adhesion and proliferation of RPEs.
