본 연구에서는 톳 분획물의 미백효과 및 그에 따른 생화학적 기전의 해석을 위하여 톳 분획물이 ${alpha}$-MSH에 의해 인위적으로 유발된 melanogenesis 과정에 있어서 어떠한 영향을 미치는 지를 조사하였고, 이때 MITF, TRP1, TRP2, tyrosinase 등과 같은 melanin 생성에 관여하는 유전자들의 발현에 어떠한 변화가 유발되었는지를 조사하였다. 톳 분획물 처리가 B16F10 mouse melanoma cell의 멜라닌의 생성량과 tyrosinase의 활성에 미치는 영향을 확인한 결과, butanol fraction (BFHF) 처리군과 water fraction (WFHF) 처리군을 제외한 ethyl extract (EEHF) 처리군, dichlorimethane fraction (CFHF ) 처리군, ethyl acetate fraction (EAFHF) 처리군 모두 농도의존적으로 멜라닌 생성량과 tyrosinase 활성이 억제되었으며, MITF, TRP1, TRP2, tyrosinase의 발현이 단백질 수준에서 감소하였음을 확인하였다. 그 중 특히 EEHF 처리군과 CFHF 처리군은 50 ${mu}g/ml$의 농도에서 멜라닌 생성량을 40.5%, 33.2% 감소시켰으며, tyrosinase 활성도 50 ${mu}g/ml$의 농도에서 각각 53.3%, 54.1% 감소시켰다. 또한 EEHF, CFHF, EAFHF 처리군에서 MITF, TRP1, TRP2, tyrosinase의 발현이 농도 의존적으로 감소하였음을 확인하였다. 이상의 결과를 살펴볼 때 톳 분획물 중 특히 EEHF 처리군과 CFHF 처리군이 B16F10 mouse melanoma cell에서 melanin 생성에 관여하는 유전자인 MITF, TRP1, TRP2, tyrosinase 발현을 억제하므로 향후 미백 기능성 소재로서의 활용이 가능할 것이라고 사료된다.
The objective of this study was to evaluate the anti-melanogenic effects of Hizikia fusiforme (HF) fractions in ${alpha}$-melanocyte stimulating hormone-induced B16F10 mouse melanoma cells. Ethanol extractions of Hizikia fusiforme (EEHF) were subjected to fraction by using dichloromethane (CFHF), ethyl acetate (EAFHF), butanol (BFHF), and water (WFHF). EEHF, CFHF, and EAFHF inhibited tyrosinase activity and melanin synthesis in B16F10 mouse melanoma cells in a dose-dependent manner. The melanin contents were inhibited by 40.5% and 33.2% in response to treatment with 50 ${mu}g/ml$ of EEHF and CFHF, respectively. In addition, tyrosinase activities showed a 53.3% and 54.1% reduction in treatment with 50 ${mu}g/ml$ of EEHF and CFHF. Western blotting analysis showed that EEHF, CFHF, and EAFHF inhibited tyrosinase, TRP-1, TRP-2, and MITF expression in a dose-dependent manner. In conclusion, these findings indicate that ethanol and dichloromethane fractions of Hizikia fusiforme, which inhibit melanin synthesis and tyrosinase activity, are effective skin-whitening agents.
