본 논문에서는 마이크로 칩 상에서 완충용액의 pH 조성과 음이온 계면활성제인 SDS(Sodium Dodecyl Sulfate) 이용하여 쉽고 빠르게 단백질을 분리 분석할 수 있는 연구를 수행 하였다. 먼저 마이크로 칩의 분리효율 최적화를 위하여 CON 단백질을 이용하여 다양한 전기장의 세기(238～507 V/cm)에서 분리 효율을 비교 실험을 하였다. 그리고 동일한 전기장 조건하에서 완충액의 pH(7～9)를 조절하여 4가지 단백질의 분리분석을 시도 하였으며, 최적의 조건으로 pH 7에서 4가지 단백질이 모두 분리가 잘 되는 것을 확인 할 수 있었다. 또한 완충용액 속의 음이온 계면활성제인 SDS 를 첨가하여 혼합되어 있는 단백질의 분리분석을 시도하였다. 그 결과 분리가 되지 않았던 두 가지의 단백질이 SDS를 첨가한 완충용액 상에서 SDS와 선택적으로 결합하여 크기에 따라 분리가 잘 이루어지는것을 관찰 하였다. 이때 분리분석의 검출 한계는 수 nM 까지 매우 우수한 검출 한계를 가짐을 확인하였다. 본 연구의 연구 결과는 세포 성분 내에서의 단백질의 기능, 새로운 신약의 개발 등으로 추후 다양한 학문 또는 응용 분야에 매우 유용하게 사용될 것으로 기대한다.
In this paper, we investigated an easy and fast protein separation and analysis method using the pH composition of buffer solution and sodium dodecyl sulfate (SDS), an anionic surfactant, on microchips. First, to optimize the separation efficiency of microchips, the separation efficiencies at various electric field intensities (238～507 V/cm) were compared using CON protein. The pH of the buffer solution (7～9) was controlled under the same electric field condition, and the separation analysis of the four proteins was performed. As a result, the four proteins were successfully separated at pH 7, an optimal condition. In addition, SDS, an anionic surfactant in a buffer solution, was added to carry out separation analysis of the mixed proteins. As a result, two proteins which had not been separated were selectively bound to SDS in the buffer solution, thereby being successfully separated according to size. This result confirmed that the detection limit of the separation analysis was up to several nM, which was an excellent detection limit. The results of this study are expected to be useful for various studies or applications by enabling identification of protein functions in cell components and development of new drugs.
1. 서론 2. 시약 및 기기 3. 실험 방법 4. 실험 결과 및 고찰 5. 결론
