닭 간의 homogenate를 만들어 soluble fraction과 mitochondrial fraction의 분획을 얻고, 이 mitochondria를 다시 파괴하여 그 105,000x g의 상청액에서 PEP carboxykinase(EC 4, 1, 1, 32)를 조제하고 황산암모늄으로 염석, Sephadex G-75 gel 여과를 하여, 이를 다시 DEAE-Sephadex A-25 column에서 0.01M-0.1M tris-HCl buffer 액 (pH 7.2)으로써 linear gradient로 전개하고 그 chromatography의 pattern을 정상 또는 hydrocortisone을 투여한 흰 leghorn 종의 병아리와 큰 닭에 대하여 비교 관찰하였다. 닭 간의 PEP carboxykinase는 간의 cytosol와 mitochondria의 두 분획에 공존하고，DEAE-Sephadex chromatography에서 유출되는 위치가 약간 다를뿐이며 그 pattern은 똑 같았다. 두 분획에 존재하는 이 효소는 병아리의 간에서는 각각 두 peak로 분리되었음으로 모두 네 가지 형태의 효소가 존재하는 셈이며, 큰 닭간에서는 각 분획에 한 peak만 나타내었음으로 모두 두 형태의 효소가 존재하였다. 큰 닭 간의 각 분획에 존재하는 이 효소는 병아리간의 해당 분획에 존재하는 이 효소의 두 peak 중 먼저 유출되는 peak의 위치에서 유출되었다. Hydrocortisone을 닭에 투여하니, 병아리 간의 PEP carboxykinase는 먼저 유출되는 효소 부분이 감퇴되었고, 뒤에 유출되는 효소 부분이 상승하였다. 큰 닭간의 이 효소도 먼저 유출되는 효소부분이 (대조군에 기존하는) 감퇴되었고 뒤에 유출되는 효소부분이 (대조군에는 없는) 나타났었다. 즉 hydrocortisone은 닭 간의 두 분획에 존재하는 PEP carboxykinase의 두 형태 중 먼저 저 농도의 영액에서 유출되는 효소 부분에는 억제적으로, 뒤에 고농도의 염액에서 유출되는 효소부분에는 항진적으로 작용하였다. 그리고 이러한 변동은 mitochondria의 이 효소도 cytosol의 것과 같이 유도 되었다.
Phosphoenolpyruvate(PEP) carboxy kinase(EC 4, 1, 1, 32) in the liver of young chickens was separated into four isozymic forms by means of DEAE-Sephadex chromatography: two were found in the mitochodrial fraction and two in the cytosolic fraction. The liver of adult chickens, however. contained only two forms of PEP carboxykinase : one existed in the mitochondrial and the another in the cytosolic fractions. The position of the mitochondrial and cytosolic PEP carboxykinase of the adult chicken liver coincided with that of the first form (being eluded earlier) of the mitochondrial or cytosolic enzymes of the young chicken liver. When hydrocortisone was administered to the chickens, the level of the first forms of PEP carboxykinase in both mitochondrial and cytosolic fractions of young and adult chicken livers decreased as compared with those of untreated controls, whereas the level of the second form of enzmes increased. The increase in the second forms of PEP carboxykinase of the adult chicken livers was found to be apparent and significant, since this form of the enzyme did not exhibited the peak on the chromatography in the normal adult chicken livers. In addition, it is noted that mitochondrial PEP carboxykinase in the chicken livers could be induced with the administration of hydrocortisone as the cytosolic PEP carboxykinase.
