인간의 peripheralblood lymphocyte에서 분리된 poly (A)$^+mRNA$를 사용하여 ${lambda}gt$ 10 cDNA library를 제조하였으며, 화학적으로 합성한 oligonucleotide를 이용하여, 이 cDNA library로부터 IFN-$gamma$ 유전자를 갖는 DNA을 분리했다. 분리된 clone 가운데 하나인 pBK04는 IFN-$gamma$의 전체 염기서열을 갖고 있었다. IFN-$gamma$를 E. coli내에서 발현시키기 위해 lpp promotor를 함유하고 있 는 pINIIIA3 vector를 사용하여 IFN-$gamma$를 발현시킬 수 있는 재조합 plasmid ($pKS{gamma}3B$)를 제조하였다. $pKS{gamma}3B$로써 형질 변환된 bacterial cell을 antiviral activity에 의해 역가 분석을 해본 결과, 높은 정도로 IFN-$gamma$를 발현시켰으며 이 IFN-$gamma$는 천연의 IFN-$gamma$에 대하여 특이성이 있는 monoclonal antibody에 의해서도 인지되었다. High copy number를 갖는 expression vector를 제조 (pHK-3) 하였으며, 이 high copy number vector를 사용하므로써 IFN-$gamma$의 생성이 증가되는 사실을 확인하였다.
A ${lambda}gt10$ cDNA library constructed with poly $A^+$ mRNA from human peripheral blood lymphocytes was screened by a synthetic oligonucleotide having IFN-$gamma$ sequence. One of the clones (pBK04) which hybridized to the oligomer was confirmed to have the whole IFN-$gamma$ coding sequence. The eDNA insert was used to express IFN-$gamma$ in E. coli under the control of lpp promoter employing pINIIIA3 vector. Cells harboring the recombinant plasmid ($pKS{gamma}3B$) expressed high level of IFN-$gamma$ assayed by antiviral activity, The molecule was also recognized by monoclonal antibody specific to a natural IFN-$gamma$. An expression vector with high copy number (pHK-3) was constructed and was successfully used for the improvement of the expression of IFN-$gamma$.
