Anti-Tac 항체를 생산하는 하브리도마 세포인 Hd-2-4-5로 부터 유전자를 분리하고 Bam HI 제한효소를 이용하여 완전 분해한 후 DNA조각을 agarose gel 상에서 크기에 따라 10가지 부분으로 나누였다. 이렇게하여 형성된 각 DNA조각을 Southern blot를 행하므로서 어느 부분이 anti-Tac 항체의 L chain을 가지고 있는지를 확인한 후 in vitro packaging 법과 situ plaque hybridization 방법을 이용하여 L chain을 함유하는 clone을 분리하였다. 이렇게 하여 얻어진 clone으로 부터 pBR 322에 subcloning 실험과 제한효소 지도작성을 통하여 배아세포의 L chain파 비 교함으로써 anti-Tac항체의 L chain의 재배열을 연구했다. 이때 anti-Tac 항체의 L chain은 $J_1-J_2$ cluster가 deletion 되어 있었고 V-J recombination에 의해서 V 부위가 직접 $J_3-J_4-J_5$ cluster에 연결되어 있음을 알 수 있었다.
A high molecular weight DNA from a hybridoma cell, Hd-2-4-5, producing anti-tac antibody was digested to completion with BamHI restriction endonuclease. The resulting DNA fragments were fractionated according to the size in 1% preparative agarose gel electrophoresis. After ligation of the fragment with modified Charon 28 and packaging in vitro, DNA fragments carrying the gene sequences coding for the variable region of light chains were detected by hybridization with mouse $J_k$ fragment labeled with $^{32}P$. We have cloned the k-sequence positive BamHI DNA fragments and characterized the cloned sequences by comparing with mouse embryonic light chain. On the basis of the results, it was concluded that the cloned light chain gene underwent somatic rearrangement. The$J_1-J_2$cluster was deleted and the region was directly linked to remaining J cluster by V-J recombination.
