쥐종양세포 (RBL-1 cells)와 인체 백혈구내에서 calcium ionophore A 23187은 칼슘이온 의존성 리폭시게나제(5-LPO)를 활성화시켜 15-HETE로부터 5, 15-diHETE의 생성을 크게 증가시켰다. 흥미롭게도 15-HPETE로부터 5, 15-diHETE로의 전환은 calcium ionophore의 영향과 무관하였으므로, 15-HPETE는 5, 15-diHETE의 생합성을 위한 효과적인 전구체임을 알 수 있었다. 별도의 비교실험에서 15-HPETE는 5-HPETE보다 3배 이상 더 효과적인 전구체로 밝혀졌다. 한편, 아라키돈산의 5번, 12번 위치의 지방산 산화(lipoxygenation)를 방지하기 위한 선택적 저해제로 15-HETE를 백혈구 세포반응액에 첨가했을 때, 아라키돈산에서 생성되는 5, 15-diHET의 양은 3배 이상 증가하였는데, 이 결과는 아라키돈산의 15번 탄소위치에서 지방산 산화반응이 선택적으로 이루어짐을 의미하는 것이다. 따라서, 아라키돈산에서 15-HPETE를 거쳐 5, 1 5-diHETE로의 전환과정은 칼슘이온 비의존성이고, 15-HETE 저해에 무관한 효소과정으로서, 5, 15-diHPETE 생성의 주요생합성 과정으로 사료된다.
In both RBL-1 cells and human leukocytes, the calcium ionophore A 23187 enhanced the conversion of 15(S)-hydroxy-5,8,11-cis-13-trans-icosatetraenoic acid (15-HETE) to 5,15-diHETE by $Ca^{++}$-dependent 5-lipoxygenase (5-LPO). Interestingly, the amount of 5,15-diHETE formed from the incubation of 15(S)-hydroperoxy-5,8,11-cis-13-trans-icosatetraenoic acid (15-HPETE) with RBL-1 cells was similar to that generated from the incubation of 15-HETE with RBL-1 cells in the presence of A23187, suggesting that the 5-LPO-catalyzed conversion of 15-HPETE into 5,15-diHETE is independent of calcium ion. As a precursorial substrate for transformation to 5,15-diHETE in human leukocytes, 15-HPETE was found to be three times more efficient than 5-HPETE (5-hydroperoxy-6- trans-8,1l,14-cis-icosatetraenoic acid). When 15-HETE, a strong inhibitor of lipoxygenation of arachidonic acid at C-5 or C-12, was added to the leukocytes suspension containing arachidonic acid and A 23187, the formation of 5,15-diHETE from arachidonic acid was increased to a great extent (>3 times). Thus, the formation of 5,15-diHETE from arachidonic acid via 15-HPETE, which is $Ca^{++}$-independent and insensitive to 15-HETE, is supposed to be the more favorable pathway for the biosynthesis of 5,15-diHETE in the intact cells.
