핵자기 공명 분광학을 이용하여 Bacillus licheniformis로부터 분비되는 serine계 단백질 가수분해 효소인 subtilisin Carlsberg에 대하여 연구하였다. 방향족 영역의 일차원 수소 핵자기 공명 스펙트럼을 얻기 위하여 Carr-Purcell-Meiboom-Gill spin echo 펄스 순서를 사용하였다. 이 효소에 결합되어 있는 $Ca^{2+}$ 이온의 EDTA에 의한 제거에 따른 영향, 활성 부위에 존재하는 Ser 221에 억제제인 phenylmethylsulfonyl fluoride의 결합에 따른 영향, 및 KCl 또는 $CaCl_2$의 첨가에 따른 영향을 조사하였다. Histidine C-2H 공명의 관찰된 변화를 최근에 밝혀진 high-resolution 결정 구조 해석 결과를 이용하여 설명할 수 있었다.
Subtilisin Carlsberg from Bacillus licheniformis has been studied by one-dimensional proton nuclear magnetic resonance spectroscopy. The Carr-Purcell-Meiboom-Gill spin echo pulse sequence has been used to record the proton NMR spectra in the aromatic region. Effects of removing bound $Ca^{2+}$ ions from the enzyme by ethylenediaminetetraacetic acid(EDTA), of binding the inhibitor, phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF), by the active site Ser 221, and of adding KCl or $CaCl_2$ have been investigated. The observed changes in histidine C-2H resonances can be interpreted in terms of the recent high-resolution crystal structure analyses.
