단백질의 황산화 반응을 in vitro로 쥐 간에서 행하였다. 쥐 간의 high-speed supernatant 단백질에 방사능 동위원소로 표시된 황산기를 ATP와 마그네슘 이온 존재하에서 반응시켜 각종 단백질에 sulfate group이 부착됨을 관찰하였다. 황산화된 단백질은 SDS-PAGE로 분리하고 방사능은 scintillation counter로 확인하였다. 단백질 분자량이 210K, 66K, 45K 및 29K 이하에서 주로 황산화 반응이 일어남을 알 수 있었다. 단백질 sulfation의 최적 반응조건을 찾기 위해 단백질의 양, 온도, 반응시간, pH, ATP의 양 및 금속 이온 등의 영향을 조사하였다.
In vitro protein sulfation in rat liver was studied. Incorporation of $[^{35}SO_4^{2-}]$ was observed in assay system containing ATP, $MgCl_2$, inorganic $[^{35}S]$ sulfate and soluble proteins from rat liver. The sulfated proteins were separated by SDS-PAGE and radioactivity of incorporated $[^{35}S]$ sulfate was detected by scintillation counter. Proteins of molecular weight of 210 K, 66 K, 45 K, and below 29 K were found to be sulfate mostly. In order to establish the optimum condition for protein sulfation, effects of amounts of proteins, incubation temperature, incubation time, pH, ATP concentration and metal ion were investigated.
