산소존재하에서 자란 대장균 HB101로부터 전기이동시 활성이 보이지 않는 하이드로지나아제 동위효소를 부분적으로 분리하였다. 분리과정은 데옥시콜레이트에 의한 세포막의 분산, 암모니움 설페이트 침전, 이온교환, 하이드록시아파타이트, 그리고 gel 여과단계 등을 포함했다. 수소 : 메철바이올로젠의 산화환원 활성도로 효소의 활성을 정량적으로 측정하였고 이온 교환 chromatography 단계부터 약 50배의 분리가 이루어졌다. 마지막으로 얻은 효소의 비활성도는 1분에 mg 단백질당 248.2 nmol(산화된 메칠바이올로젠)이였고, 이 효소는 39 kDa과 30 kDa 두개의 폴리펩타이드로 구성되어 있었다. 또한 효소의 활성이 가장 큰 pH 범위는 7과 8 사이였고 $70^{circ}C$에서도 최고활성이 52%를 유지하였다.
An electrophoretically labile hydrogenase from the membrane fraction of aerobically grown Escherichia coli was partially purified. The enzyme was assayed by quantification of the $H_2$ : methyl viologen oxidoreductase activity and purification was achieved 50-fold by ion exchange chromatography and gel filtration steps. The specific activity of the final preparation was 248.2 nmol methyl viologen oxidized $min^{-1}$ mg $protein^{-1}$. The purified enzyme consists of two subunits whose molecular weights are 39000 D and 30000 D. The enzyme showed a pH optimum between 7 and 8, and retained 52% of the maximal activity at $70^{circ}C$.
