에스트로젠을 MCF-7 사람 유방암 세포에 투여하면 선택적으로 이미 알려진 단백질 분자량 160,000, 52,000 이외에 분자량 32,000 단백질이 세포로부터 합성되어 분비되고, 이러한 에스트로젠 작용은 안티에스트로젠을 병용 투여하면 감소함이 관찰되었다. MCF-7 사람 유방암 세포를 활성탄소를 이용하여 에스트로젠을 제거한 혈청을 포함하고, phenol red를 제거한 배지에서 배양하면 대조군의 세포에서 분비되는 분자량 32,000 단백질 양은 매우 적고, 에스트로젠을 투여하면 이 단백질의 분비가 대조군에 비하여 10배 증가함을 관찰하였다. 이러한 에스트로젠의 작용은 에스트로젠을 6시간 투여했을 때부터 관찰되어 2일 동안 투여하였을 때 효과가 최대로 관찰되었다. Tunicamycin과 endoglycosidase H 존재하에 실험을 실시하여 본 결과 이들 에스트로젠에 의해 증가된 분자량 32,000 단백질은 당단백질임을 알 수 있다. 이들 단백질들은 MCF-7 사람 유방암 세포에서 에스트로젠 작용의 지표로써 제시하고저 한다.
Estrogen selectively increased the production of sercreted proteins of 32,000 Mr, 52,000 Mr, 160,000 Mr in estrogen receptor positive human breast cancer MCF-7 cells but not in estrogen receptor negative MDA-MB-231 cells, and the production of these proteins by estrogen was inhibited by concomitant antiestrogen treatment. Proteins were detected by [$^{35}S$]methionine and [$^{35}S$]cysteine labeling of the cells and analysis of proteins by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gels and autoradiography. Enhanced production of 32,000 Mr, 52,000 Mr, 160,000 Mr proteins were observed within 6 hours of estrogen treatment, with maximal synthesis seen at 2 days. When cells were grown in estrogen free condition, i.e. in charcoaldextran treated serum in medium lacking the estrogen phenol red, the basal level of the 32,000 Mr protein was extremely low, and estrogen stimulation results in 10-fold increase in the production of this protein. Amino acid incorporation conducted in the presence of tunicamycin and endoglycosidase H indicates that this protein is glycoprotein. This protein might serve as an useful marker for estrogen action and may be involved in estrogen modulation of cell proliferation and/or cell function.
