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수용성 액체 2 상계를 이용한 Bacillus subtilis neutral protease의 분획 I. Polyethylene glycol/potassium phosphate buffer 액체 2 상계를 이용한 counter-current distribution
한정훈, 이철호, Han. Jung-Hoon, Lee. Cherl-Ho 생화학분자생물학회 한국생화학회지 6 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1989, Vol.22 No.4 373-378 (6 pages)
2 상계를 이용하여 Bacillus subtilis에서 생산된 neutral protease를 counter-current distribution으로 정제하였고 ammonium sulfate, DEAE-cellulose, CM-cellulose 이온교환 chromatography를 이용한 일반적인 정제법과 비교해 보았다. 그 결과 counter-current distribution을 이용하여 조효소액보다 30배 높은 specific activity를 얻었는데 이 값은 일반적인 정제법으로 얻은 10.9배보다 약 3배 높은 값이었다. 따라서 counter-current distribution에 의한 정제가 재래식 정제법보다 단순하며 더 높은 정제효과를 얻을 수 있음을... -
쥐 간의 미크로좀 Aldehyde dehydrogenase의 정제와 특성
주충노, 오억수, Joo. Chung-No, Oh. Eog-Soo 생화학분자생물학회 한국생화학회지 9 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1989, Vol.22 No.3 312-320 (9 pages)
51, 17, 32%로서 절반은 미토콘드리아에 편중되어 있었으나 미크로좀에도 상당량이 존재함을 확인하였다. Ammonium sulfate 침전, gel filtration, DEAE cellulose, CM-cellulose, blue sepharose affinity chromatography법 등을 이용하여 세 가지 미크로좀 aldehyde dehydrogenase, 즉 ALDH-I, ALDA-II, ALDH-III가 분리되었고 acetaldehyde에 대한 Km은 각각 2.77, 3.5, 1.56mM이었으며 다른 aldehyde, 즉 propionaldehyde, glutaraldehyde에 대해서도 활성을 나타내었다. Sephacryl S-300 gel filtration 법으로 분자량을 측정한 결과... -
Corynebacterium glutamicum의 glutamate dehydrogenase의 정제 및 성질
박미선, 최순영, 김성진, 민경희, Park. Mee-Sun, Choi. Soon-Young, Kim. Sung-Jin, Min. Kyung-Hee 생화학분자생물학회 한국생화학회지 6 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1989, Vol.22 No.2 122-127 (6 pages)
Corynebacterium glutamicum의 glutamate dehydrogenase를 ammonium sulfate 분획, DEAE-cellulose column chromatography, ultragel ACA-34, DEAE-sphacel, HPLC(TSK-gel)를 사용하여 분리 정제하였다. HPLC gel 여과에 의한 이 효소의 분자량은 400,000이었으며, SDS-PAGE에 의한 subunits의 분자량은 $63,000{pm}5,000$이었다. 분자량 측정의 결과로 glutamate dehydrogenase는 동일한 분자량을 가진 subunits가 6개 있음을 암시하여 주었다. 이 효소의 최적 pH는 8.0이었고, 최적 효소 활성에 대한 ${alpha}$-ketoglutarate, $NH_4Cl$... -
소뇌에서 Protein Carboxyl Methyltransferase Isoenzymes의 분리 및 특성에 관한 연구
황영미, 전길자, Whang. Young-Mi, Jhon. Gil-Ja 생화학분자생물학회 한국생화학회지 6 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1988, Vol.21 No.3 233-238 (6 pages)
1,000배 정제하였다. 소뇌의 cytosol을 70% ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose chromatography, SAH-Sepharose 4B affinity chromatography 방법으로 정제하였으며, 정제된 효소용액을 HPLC (DEAE-5PW column)로 분석하여 3종류의 isoenzymes을 분리하였고 용출되는 순서에 따라 PCMI, PCMII, PCMIII으로 명명하였다. 더욱 정제된 효소용액으후 2차 전기영동한 결과 isoelectric point가 각각 6.25, 6.20, 5.80이었고 분자량은 모두 28,000이었다. 이 HPLC 분석방법은 소량의 사료로도 3개의 isoenzymes을 분리할 수 있는... -
Isolation and Characterization of a Cellulase from Cellulomonas sp. ATCC 21399
한동표, 김택영, Han. Dong-Pyou, Kim. Taik-Yung 생화학분자생물학회 한국생화학회지 6 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1987, Vol.20 No.3 273-278 (6 pages)
중 한 성분을 ammonium sulfate 분획분리, Sephadex G-150 gel filtration 크로마토그라피, DEAE-Sephadex A-25 이온교환 크로마토그라피 방법 등으로 분리 정제하였다. 효소의 정제 정도는 PAGE와 SDS-PAGE 방법을 이용하여 확인하였다. 이 효소는 당단백질이며 분자량이 약 64,000으로 추정되었다. 이 효소의 활성도가 최적인 온도는 $55^{circ}C$이고, 최적 pH는 5.5로 밝혀졌고 pH 7.0에서 8.5 사이에는 활성도에 변화는 주지 않음이 밝혀졌다. 열 안정성 조사에서 이 효소률 $60^{circ}C$에서 $2frac{1}{2}$ 시간동안 열처리 시키면... -
동물성 부유생물의 ${NH_4}^+$ 분비와 glutamate dehydrogenase 활성도에 대한 섭이변화의 영향
박용철, Park. Yong-Chul 생화학분자생물학회 한국생화학회지 6 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1986, Vol.19 No.3 251-256 (6 pages)
미국 동부 연안에서 채취된 해양 동물성 부유생물의 섭이변화 실험 결과, ${NH_4}^+$ 분비율이 섭이중지 5일 후부터 감소되었으며 섭이중지 기간동안 oxidative deamination protein specific glutamate dehydrogenase (GDH) 방향으로는 증가된 반면, 단백질 양은 감소되었다. GDH 활성도와 ${NH_4}^+$ 분비율과의 비율(GDH/excretion)은 정상조건에서 22.7에서 18.2의 범위를 보였으나, 섭이중지 4~5일 후에는 42.3에서 103.5까지 증가되었다. 이 사실은 GDH 활성도를 통한 해양 부유동물의 ${NH_4}^+$ 분비율의 간접정량이 실제... -
Canavanine 존재시 합성된 보리 $alpha$-Amylase의 정제와 그 생화학적 성질
전방욱, 권영명, Jun. Bang-Ook, Kwon. Young-Myung 생화학분자생물학회 한국생화학회지 8 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1986, Vol.19 No.2 179-186 (8 pages)
얻은 $alpha$-amylase (canavanine 처리구의 $alpha$-amylase)를 ammonium sulfate분획, CHA-affinity chromatography와 DEAE-cellulose chromatography를 사용하여 정제하였고 이들 두 효소의 성질을 비교 조사하였다. Canavanine 처리구의 $alpha$-amylase를 아마노산 분석한 결과 $alpha$-amylase 내에 1.5~1.7 mol의 canavanine이 투입되었음이 확인되었다. 대조구의 $alpha$-amylase와 canavanine 처리구의 $alpha$-amylase의 pI값은 각각 5.2와 4.9였다. 그러나 분자량은 50,000 dalton으로 동일하게 나타났으며, 최적온도, 최적... -
닭 간의 Ornithine Aminotransferase에 관한 연구
김경순, 박종옥, 박광숙, Kim. Gyung-Soon, Park. Jong-Ok, Park. Kwang-Sook 생화학분자생물학회 한국생화학회지 7 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1985, Vol.18 No.2 109-115 (7 pages)
이 효소를 열처리, ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose ion exchange chromatography, Sephadex G-200 filtration, CM-Sephadex column chromatography를 이용하여 정제해서 disc polyacrylamide gel electrophoresis를 하였더니 하나의 단백질 띠가 얻어졌다. 이 정제된 효소를 이용해서 몇가지 성질을 조사해본 결과는 다음과 갈다. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis에 의해 측정된 분자량은 62,000이었고 gel filtration에 의한 값은 63,000이었으므로 이 효소는 monomer로 존재한다고 생각되었다. L-ornithine과... -
Swamp eel (Monopterus albus)혈장 Albumin분획의 정제 및 물리화학적 성상에 관한 연구
김상복, 장정순, Kim. Sang-Bog, Chang. Chung-Soon 생화학분자생물학회 한국생화학회지 8 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1982, Vol.15 No.4 336-343 (8 pages)
드렁허리(Monopterus albus)로부터 albumin분획 만을 정제하기 위하여 ammonium sulfate로 crude albumin분획을 얻은 후, 다시 DEAE-Sephadex A-50을 이용한 column chromatography로 albumin분획을 정제하였다. 정제된 albumin분획의 물리화학적 성상을 알기 위하여 organic cation인 rivanol을 이용한 albumin분획의 확인실험, $NaDodSO_4$-PAGE에 의한 분자량 측정, 흡광계수, 침강계수 및 -SH 함량등을 측정하였다. 즉 어류의 혈장으로부터 albumin분획을 분리할때 완만한 구배농도의 증가와 많은 양의 buffer로 유출시켰을 때 정제된... -
소나무 꽃가루에서 분리한 Trehalase의 정제 및 성상에 관한 연구
이동욱, 이희성, 조성희, Lee. Dong-Wook, Lee. Hi-Sung, Cho. Sung-Hee 생화학분자생물학회 한국생화학회지 13 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1981, Vol.14 No.2 148-160 (13 pages)
trehalase 를 ammonium sulfate에 의한 침전, DEAE-cellulose 및 Sephadex G-200 column chromatography를 행하여 정제하였으며 그 성상을 관찰하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 소나무 꽃가루에 있는 trehalase 는 cytosol에 약 80% 그리고 mitochondria에 약 4%, nuclei 에 약 10% 함유되어 있었다. 2. 소나무 꽃가루의 세포질 분획에서 이 효소를 81배 정제하였으며, 기질로는 trehalose에 대해서만 활성을 나타냈다. 3. 이 효소활성의 최적 pH 는 5.4였으며, 최적온도는 $60^{circ}C$였다. 4. 이 효소의 기질에 대한 Km값은 $2.56{...


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